一、硕士点概况首先咱们来看一下科大的生物学咋样，科大一直以来都以基础学科为发展重心，科大的生命科学学院的前身为中国科学技术大学生物物理系，由著名科学家贝时璋先生于1958年创建。具体发展历史大家自己去官网看吧，目前科大有八个研究部:生物化学与分子生物学研究部、神经生物学与生物物理学研究部、系统生物学研究部、医药生物技术研究部、微生物学与免疫学研究部、细胞生物学与发育生物学研究部、生物医学工程研究部、植物与生态学工程研究部；另外，学院设有五个科研技术平台：生命科学公共实验中心、生物安全三级实验室、实验动物中心、GMP中试基地、集成影像中心；还有各种研究基地合平台，总之实验室资源很丰富。中科大生物学招生单位有生命科学学院、附属第一医院、苏州生物医学工程技术研究所、研究生院科学岛分院，生物与医药招生单位有生命科学学院、附属第一医院、苏州生物医学工程技术研究所、研究生院科学岛分院、纳米技术与纳米仿生学院（苏州纳米所），主要由生命科学学院招生。在第四轮学科评估中，中科大生物学评估为A，确实也是非常厉害，那考研难度到底咋样呢，我觉得相对于其他热门专业，难度肯定是低一些的，但是不是随便就是能考上的，如果不下足功夫感觉也难以考上，总体来说我觉得难度不是很大，具体我们下面以数据说话，来来上干货。二、信息公开度报录比：无考试大纲：有参考书目：有是否收调剂：上线人数不足时候会收是否保护第一志愿：保护第一志愿是否开设夏令营：开设是否一级学科统一招生：是是否一级学科统一命题：是是否一级学科统一划线：是三、中科大生物学考试科目科大上文也说了，有很多院所都招收研究生，不过总体来说生命科学学院招收的人数占绝大多数，以下以生命科学与医学部（生命科学学院和第一附属医院）为例说明考试科目以上生物学是学硕，生物与医药是专硕四、招生人数和复试线如下中科大2020和2021统考招生人数中科大2020和2021统考招生人数五、参考书目可考试大纲关于考试大纲和考试科目见官网中国科学技术大学研究生招生在线-招生简章yz.ustc.edu.cn/sszs_2021/cksm3.html六、2022复试分析线下复试情况：复试形式：机考+面试。复试内容：复试（机考）为专业知识综合考试，涵盖所有本科基础生物学实验教学内容。其中1/3为英文试题。复试成绩：满分100分。机考满分150分，面试满分100分，复试成绩位于参加复试考生的最后5%，复试成绩为不合格，不予录取。复试成绩=（机考成绩+面试成绩）÷2.5。最终成绩：满分100分。初试成绩不计政治，复试成绩占比5/13。即：最终成绩=（初试成绩【不计政治】÷4×8+复试成绩×5）÷13。录取 按最终成绩由高到低排序，提出拟录取名单报批。为保证招生质量，报批人数可小于招生计划。线上复试情况：生物学相关学科网络综合面试内容包括专业知识综合考核和综合素质考查。专业知识综合考核（替代招生简章中的专业知识综合考试部分）包括本科生物学专业与实验知识考核和英语能力测试，综合素质考查主要考察考生思想政治素质和品德、逻辑思维和语言表达、科研能力、创新潜质等方面。生物学相关学科网络综合面试成绩满分为250分，其中专业知识综合考核150分，综合素质考查100分。生物学相关学科复试成绩合格的考生，按照部分初试科目成绩和复试成绩之和进行总成绩排序，作为拟录取依据。拟录取依据的总分满分为650分，其中初试成绩满分400分（包括初试英语、专业课一、专业课二成绩），占62％；复试成绩满分250分，占38％。下面是去年初试成绩分布情况。七、22级上岸高分经验为了给23学弟学妹带来最具有时效的专业课复习攻略，学长特邀请22级几个高分上岸的同学分享他们的上岸经验，希望能帮到大家【中科大生物学404分考研上岸经验贴——专业课考618生理学】第一、关于择校和定专业学校选择我当初选择这个学校，有以下几个原因：1. 20年学校直系学长学姐上岸科大人数较多；2. 在合肥（我家就在合肥）；3. 校内调剂较多；4. 不歧视本科学历（我自己就是双非普通一本）；5. 初试不压分；6. 难度中等，没有偏题怪题；7. 科大生物专业排名挺好专业课选择我选择的是 841 细胞生物学和 618 生理学，学弟学妹主要会在生化和生理之间纠结。1. 生理or生化 哪个看起书来比较不头疼？（如果之前没有学过生理，可以网上搜索生理的课听一两节感受一下）2. 你更擅长偏背诵型的题or计算型的题？（生化有计算，具体可以网上搜搜这两套题型的科大真题看看）3. 细胞生物学是需要大量背诵的，你如果选择生理，能不能做好疯狂背两本书的准备？4. 我个人认为选择生理和生化不影响复试老师对你的看法以及选择导师的差异（但网上有人说复试老师比较喜欢选生化的初试学生，这个自己斟酌）。若说影响，可能就是无论你初试选择是生理or生化，复试都会包含这两门的题。5. 生理有英译汉，生化我不太清楚，可以结合 2 一起综合一下。6. 选生理可能后期不好调剂，生化考的人则较多。无论选择什么，一旦选择后就不要改了，后期会很麻烦也很影响心态。7. （个人感觉）生理比生化总体得分高一些，具体你们可以比对每年上岸的成绩。差不多我暂时就想到这些选择纠结的想法，稍后如有其他问题，欢迎学弟学妹私聊我。我也会及时更新。第二、初试经验我购买/使用的相关书籍1. 政治肖秀荣——《精讲精练》；《1000题》；《肖四》；《肖八》；《形势政策》；《考点预测》；《考前直播课讲义》；《知识点提要（未用）》；腿姐——《腿四》；《腿姐冲刺班讲义》；《腿姐点睛押题讲义》；徐涛——《冲刺背诵笔记》；《考前预测必备20题》（几乎未用）；《形势与政策》（未用） 《徐涛八套卷》（几乎未写）；《风中劲草》（未使用）；2. 英语真题——《01—20黄皮书》词汇——黄皮书自带词汇书；《词汇的逻辑》 唐迟（未看）作文——《写作不过如此》 刘晓燕；《何凯文写作冲刺20篇》（几乎未用）；《王江涛预测作文20篇》（几乎未用）考研阅读相关热点文章期刊（看的少）3. 841细胞生物学《细胞生物学》—翟中和 （第五版）《细胞生物学学习指南》（高等教育出版社）（和书本配套的，编书的大佬出的配套资料）蓝皮书系列：841细胞生物学历年真题及答案解析841细胞生物学考点解析与高分笔记841细胞生物学重点总结及背诵手册4. 618生理学《生理学》—朱大年 第九版（人民卫生出版社）《生理学学习指导与习题集》 第三版 （人民卫生出版社）绿皮书系列：618生理学历年真题及答案解析618生理学考点解析618生理学重点总结及背诵手册PS：我没看的不代表不好，因为我时间有限，没来的及看，所以不能做评判。第三、初试各科复习策略1. 政治：76分我是九月份开始的，跟徐涛课看肖秀荣精讲精练过了一遍。然后就到十月份了。接着开始刷1000题，正好也可以回忆一下前面看的课。差不多到十一月上中旬肖秀荣知识点提要和徐涛冲刺笔记出了，我两个都买了，选择了一下，看的徐涛冲刺笔记（自己觉得更加轻松一些，看肖老的感觉好严肃）十一月中旬差不多，肖秀荣考点预测出来了，里面全都是大题，直接拿来背的那种（基本上是后期肖四肖八大题的来源），我一开始背了一点，但是鉴于对真题没什么概念，所以效率不高，就放弃了。与此同时，是肖老的形势政策，是一年中从一月大约至十一月中旬的时事热点，就每天读一点。12月上旬，肖八差不多出来了。此时我1000题还未刷完...然后就做肖八了。我只做了选择题，大题没看。接着是徐涛的八套卷和腿四出了。做完了腿四的选择以及徐涛的前两套好像（我觉得我错的有点离谱和做肖八腿四比起来）。这个时候我看了腿姐的冲刺班视频，配她的讲义（强烈推荐 大题 选择 时事 技巧 套路 ）然后我对大题有了一定的概念，回过头来扫了一遍肖八腿四的大题，做到心中有数。十二月中旬接着肖四，徐涛20题，徐涛形势政策出来了，肖四肯定是要写的，依然是只写选择。徐涛20题和肖老考点预测类似，我没怎么看，他的形势政策也没怎么看。这段时间要开始背大题了，我前期除了背过一点肖老的考点预测，就没有背过大题。但是看了腿姐的冲刺课，自己整理了一下大题，并针对性的选择肖老徐涛腿姐给出的大题模板自己整理了一份，然后就开始背这个。当然，肖四的大题要好好看一下（我没有说背，因为我整理的里面就可以涵盖这些），选择题开始二刷一遍，主要是一些固定搭配（腿姐说的keyword），形势政策类的选择题以及自己总是会错的基础类选择题（适时可以翻一下冲刺笔记，看看自己哪里忘了）。考前十天左右，腿姐的押题视频和讲义（主要是把之前冲刺讲义再进行压缩，每一大题都押两题，减少背诵量以及一些新的时政补充）前面背过一遍大题，这里只是巩固加深。同时，肖老的考前直播课讲义，看了一下肖老补充的大题，以及选择题的预测。最后，在考前再背一遍大题，以及选择题关键词记忆。PS：如果政治不求高分，完全可以只背肖四，照样估计60＋。看个人选择。所以大家自己衡量一下性价比，选择适合自己的学习政治的方式，毕竟还要以专业课为主。（科大综合排名不计初试政治，但政治分数线60，只背肖四不能100%保证60＋，虽然大概率可以）。2. 英语：65分两个part：基础部分（单词 语法 长难句）& 真题部分(阅读 作文 翻译 七选五 完型)基础part单词：①我用的不背单词这个app，选择的词库是真题5500，从四月开始刷，前期没事就看看，只规定每天要背多少个，前期是50一天，没有固定背的时间。到六七月份我会规定每天背100个，时间放在上午前一两个小时（因为这个app是要先回忆先前背过的单词）。大概十月十一月的时候我就上升到200一天左右。②当开始刷真题的时候，就把阅读里面每一篇自己不认识的单词记下来，这就形成了自己的真题单词库。③黄皮书自带的单词书，是按照考研高频程度来分的，后期我主要背这个。语法：我只看了唐迟的语法课，因为短小精悍，主打考研常见语法。同时也推田静的语法课，比较系统全面，适合基础不太好以及有充足时间的同学。长难句：同语法，我看的是唐迟的视频，依旧因为短小精悍。真题part阅读：先自己把全套做一遍，再跟着唐迟的视频过一遍。再自己做一遍。主要是要找到选项的逻辑，和文章的逻辑，这样拿分就稳准狠，具体方法去看唐迟。唐迟阅读没话说！作文：刘晓燕的作文课＋她的作文书，然后自己整理一套模板。翻译，七选五，完型：宋逸轩（属于唐迟考上的逻辑团队的）小三门在后期再看就行，占比相对较少。也有很多技巧跟着宋逸轩老师就好。考试时写的顺序：小作文-大作文-阅读-七选五-翻译-完型（这是我的顺序）3. 618生理学：138分专业课是最重要的。所以花在专业课上的时间占比一定是最多的。首先要申明一下，由于去年疫情原因，我开始考研复习时间较晚，真正开始专业课复习在七月中旬。但不要抱着七月份准备也来得急的这种想法，你们可以早开始就早开始。第一遍，书＋视频（杨鹏杰，科大mooc， 华中科技大学mooc，北京大学mooc，华中农业大学mooc）＋书配套的app（人卫图书增值）。主要是以自己能理解为主，所以会结合着很多视频一起学习，然后做笔记。如果实在不会也不要硬理解，有很多点你在二刷三刷的时候自然就懂了。第二遍，书，习题（生理学学习指导与习题集），补充笔记。第三遍，开始做真题，在书上相应位置做好标记，这样做完，你就大概清楚这个学校喜欢考哪些内容，怎么考等等。同时，整理出小题可能会考的点，包括填空，选择，判断。第四遍，背！我是背书，着重把考过的题重点背，但没考过的也要背，同时开始背英语专业词汇（书后面），我是自己筛了一下哪些可能考，哪些一定不考的词汇，然后每天和背英语单词一起，一天一页，读加背。这样到你考前应该能读背个三四遍。第五遍，我是在考生理前的晚上整体过了一遍。4. 841细胞生物学：125分第一遍，看书＋川大慕课（两类：上课录像和mooc）＋记笔记第二遍，书，蓝皮书笔记与背诵手册，补充笔记。第三遍，蓝皮书汇总了历年真题，第三遍就是做真题，细胞近几年题型都保持为 名词解释 简答 问答 这三种题型，所以也就是说都是背诵的知识点。我就按照章节把每年真题在这一章的考题用word汇总了一下，主要还是总结名词解释和大题。小题可以看一下，然后考虑它是否可以变成大题，如果可以就把相应的小题当作大题来整理背诵。第四遍，背书和真题。没什么好说的，就是反反复复的的背。第五遍，也是考前一天晚上在背生理前快速过了一半，剩下一半我放在了第二天中午背。因为是上午考生理，下午考细胞。综上，整体来看，我两门专业课复习方法差不多，都是过了五遍。大家可以根据自己看书的进度和考研剩余天数长短来选择过专业课的遍数。你身边可能有人过了十几遍，那是他看书比较快。如果你和我一样，看书比较慢，过个4，5遍是没问题的，主要还是得自己心里清楚自己到底复习的怎么样。不要人云亦云，亦或盲目焦虑。第四、复试经验考试形式科大近两年都是采取了线上复试。考试内容复试考核都是本科阶段所有所学基础知识，包括细胞，生化，分子，生理，植物，动物，微生物等等专业基础课程知识和相应实验以及专业英语读译能力。知道它考察的是什么了，相应的就可以分为三大类：①专业理论知识②专业实验知识③专业文献翻译复试流程①线上：自我介绍--抽题（可能会抽两套）（专业知识＋文献翻译）--综合问答②线下：机考（实验题，1/3为英文试题）＋面试（流程同线上，只是抽题只抽一套题）复试报录比: 1:1.2复试分数线对于22级学弟学妹来说，21考研复试分数线为340，其中政治英语单科线均为60。（20考研不能作为参考）复试准备准备复试的时间有三种：①心里特别确定一定能考上，那就可以初试结束就开始准备复试，这样你就有三个多月的准备时间，你可以充分准备以上三大类。②等到初试成绩出来，很高分，稳进复试，那么差不多有将近一个月的准备时间。③初试成绩出来，分数很危险，不知道自己能不能进复试，那就要等到官网出复试分数线，从复试线公布到复试差不多一周多的时间。关于我的复试准备我是属于第二种，所以我就以第二种的复习时长来说。时间短，任务重。①专业理论知识，我没什么时间看。我主要看了实验和翻译。②官网有指定的实验教材:包括细胞，生化分子，生理，除此之外，官网还要求了普通生物学实验书，微生物学实验书，遗传学实验书。我主要看了科大指定的生化分子，细胞，生理这三本实验书。微生物和遗传看了一点点。③文献翻译：两本书：a、生物专业英语-蒋悟生，这本书很基础，把里面单词背背，文章自己读和翻一遍。 b、基因X，不需要全看完，这本书1000多页，也看不完。看每一章的综述就差不多了。④自我介绍控制在2min内，所以一些什么社团学生会经历就没必要说了。老师着重看的是科研能力，专业基础知识能力，英语能力等。⑤综合问答，主要看你科研能力和抗压能力以及自己有没有对未来的自我规划和清楚认知等等。这个考前在B站上面多搜搜，自己总结总结，背诵即可。最后，复试最重要的是心态，不要紧张，不会的题不要逞强，坦诚说出来即可，具体的复试技巧复试前多看B站视频即可。写给学弟学妹的建议考研就是磨练你意志力的时候，一旦选择了就不要轻易放弃或犹豫不定。只要你能坚持到最后，你的成绩不会辜负你的。我到12月份的时候也有想放弃的时候，确实颓废了几天，也许放弃后的一瞬间是轻松的，但时间一长，这种压力和不安比你没放弃前更加难熬。所以我又重新拾起了书本，最终，成绩没有辜负我。所以，学弟学妹们，考研前期可以适当节奏慢一点没关系的，其实我们努力想得到一件什么东西时候，只要沉着镇静、实事求是，就可以轻易地、神不知鬼不觉地达到目的，而如果过于使劲，闹得太凶，就像一个小孩扯桌布，结果却是一无所获，只不过把桌上的好东西都扯到地上，永远也得不到了，所以大家要明白考研是场持久战，后期强度是很大的，战线太长，生理上和精神上都吃不消的，要学会适当调整自己，相信我，会赢的。所以，慢慢来，加油鸭，学姐在科大等你们~以上就是22级初试404的学姐的经验贴，无论是备考攻略还是攻略都是非常值得23级学弟学妹好好学习的，希望能帮到大家
我有哦 。。。。生态学和 细胞生物学 的历年真题
一、是非题：15题，每题1分，共15分。答"是"写"+"，答"非"写"- "，写在题后的（）中。 1．维生素对人体的生长和健康是必需的，但人体不能合成维生素。 （ ） 2．能被某种振奋分子识别，并与其特异和共价结合的原子，原子团和分子，称为配基。 （ ） 3．当不同分子大小的蛋白质混合物流经凝胶柱层析时，小分子物质因体积小最先被洗脱出来。 （ ） 4．酶的最适pH与酶的等电点是两个不同的概念，但两者之间有相关性，两值通常比较接近或相同。 （ ） 5．对于一个酶而言，其过渡态的底物类似物与底物的物相比较，是更有效的竞争性抑制剂。 （ ） 6．Km值是酶的牲常数之一，与酶浓度、pH值、离子强度等条件或因素无关。 （ ） 7．磷脂酶A水解脂生成磷脂酸。 （ ） 8．NAD 不能由细胞浆通过线粒体内膜进入线柆体内，而NADH能在通过线粒体内膜后被氧化。 （ ） 9．寡霉素是线粒体ATP合成酶的抑制剂。 （ ） 10．核苷磷酸化酶催化腺苷的磷酸化，生成腺嘌呤和核糖-5-磷酸。 （ ） 12．肿瘤RNA病毒的复制过程为RNA->DNA->RNA。 （ ） 13．肾上腺素能与细胞膜上专一受体结合，这种激素 受体复合物能直接活化环化酶，使细胞cAMP浓度增加，引起级联反应。 （ ） 14．维生素E是一种抗氧化剂，对线体膜上的磷脂有抗自由的作用。 （ ） 15．吡哆醛、吡哆胺和吡哆醇的磷酸酯都可以作为转氨的辅酶。 （ ） 二、选择题：20题，每题1分，共20分。请将选择答案的号码填入（）中。 1．为稳定胶原三股螺旋结构，三联体的每三个氨基酸的位置必须是： （ ） ①丙氨酸； ②谷氨酸； ③甘氨酸 2．分离含胡二硫键的肽段可以用： （ ） ①SDS-PAGE电泳； ②对角线电泳； ③琼脂糖电泳 3．引起疯牛病（牛海绵脑病）的病原体是： （ ） ①一种DNA； ②一种RNA； ③一种蛋白质； ④一种多糖 4．胰岛素等激素的受体以及上成或表皮生长因子的受体都是一种： （ ） ①激酶； ②脱氢酶； ③转氨酶 5．在酶的可逆抑制剂中，不影响酶的二级常数（Kcat/Km）的是： （ ） ①竞争性抑制剂； ②非竞争性抑制剂； ③反竞争性抑制剂； ④都不是 6．“多酶体系”是指一个代谢过程中几个酶殗了一个反应链体系，多酶体系中的酶通常具有以下性质。 （ ） ① 只是在功能上相互有联系，在结构上互不相关，不存在相互作用； ② 不仅在功能上相互有联系，在结构上也有相互联系，形成复合体； ③ 上述两种情况都存在。 7．所谓“代谢物”指的是下面哪一条？ （ ） ① 特指代谢反应中的反应物； ② 特指代谢反应中的产物； ③ 特指代谢反应中的中间物； ④ 所有代谢反应中的反应物、中间物和产物都称为代谢物。 8．有的酶存在多种同工酶形式，这些同工酶所催化的反应： （ ） 中国科学院研究生院历年招收攻读硕士学位研究生入学统一考试试题 科目名称：生物化学与分子生物学 5 ① 并不完全相同； ② 完全相同，而且反应的平衡常数也相同； ③ 完全相同，但由于每种同工酶活性不同，反应平衡常数可以不相同。 9．脂肪肝是一种代谢疾病，它的产生主要是由于： （ ） ① 肝脏脂肪水解代谢障碍； ② 肝脏蛋白不能及时将肝细胞脂肪排出； ③ 肝脏细胞摄取过多游离脂肪酸； ④ 肝脏细胞膜脂肪酸载体异常 10．线粒体ATP/ADP交换载体在细胞内的作用是： （ ） ① 需能传送； ② 促进传送； ③ ATP、ADP的通道； ④ ATP水解酶 11．辅酶Q是线粒体内膜： （ ） ① NADH脱氢酶的辅酶； ② 琥珀酸脱氢酶的辅酶； ③ 二羧酸载体； ④ 呼吸链的氢载体 12．线粒体蛋白的跨膜传送是一种： （ ） ① 类似细胞膜的吞噬作用； ② 蛋白质解折叠后传送； ③ 通过对各个蛋白质专一的载体传送； ④ 膜内外同类蛋白质交换 13．Poly d（A-T）的Tm值较poly d（G C）为： （ ） ① 高； ②低； ③相同 14．反密码子为IGC，可识别密码子： （ ） ① GCA；； ②GCG；； ③ACG 15．RNA形成二级结构的碱基对，除了A-U和G-C外，还有： （ ） ① A C ②A G ③G U 16．RNA用强碱水解，产生： （ ） ① 2'和5'核苷酸混合物； ② 2'和3'核苷酸混合物； ③ 3'和5'核苷酸混合物； 17．能与受体结合，形成激素 受体复合物，进入细胞核调节基因表达的激素是： （ ） ① 甲状腺素 ② 肾上腺素； ③ 溏皮质激素； ④ 前列腺素 18．原核生物基因转终止子在终止点前均有： （ ） ① 回文结构； ② 多聚A序列； ③ TATA序列； ④ 多聚T序列 19．能专门水解DNA RNA杂交分子中RNA的酶是 （ ） ① DNA聚合酶I； ② 逆转录酶； ③ Rnase A； ④ 核酸外切酶III 20．真核生物中，存在于核仁中的RNA聚合酶是： （ ） ① RNA聚合酶I； ②RNA聚合酶II； ③RNA聚合酶III 三、填空题：9题，每空格答对1分，共15分 1． 已知三种超二级结构的基本组合形式______，______，______。 2． Western印迹法的原理是用______鉴定蛋白质的一种方法。 3． 酶容易失活，如何保存酶制品是一个很重要的问题。通常酶制品的保存方法有______和______等。 4． 红细胞膜带3蛋白是一种______。 5． 肝素是一种________，它的主要药理作用是________。 6． 细胞核内除了DNA外，还发现至少有二类小分子RNA，它们是核小分子RNA和________。 7． 核酸变性时，紫上吸收值增高，叫________效应。 8． 限制性内切酶特异识别和切割DNA分子中的回文结构，形成末端有粘性末端和________末端。 中国科学院研究生院历年招收攻读硕士学位研究生入学统一考试试题 科目名称：生物化学与分子生物学 6 9． 内质网分为两种类型，一种是粗糙内质网，为________的场所；另一种为光滑型内质网，与________和________合成有关。 四、问答题：10题，每题5分，共50分。 1． 根据氨基酸通式的R基团极性性质，20种常见的氨基酸可分成哪四类？ 2． 简述蛋白质翻译后的加工过程。 3． 葡萄糖酵解过程的第一步是葡萄糖磷酸化形成6-磷酸葡萄糖，催化这一步反应有两种酶，已糖激酶和葡萄糖激酶。己糖激酶对葡萄糖的Km值远低于平时细胞内葡萄糖浓度，而葡萄糖激酶的Km值比较接近平时细胞内葡萄糖浓度。此外，己糖激酶受6-磷酸葡萄糖强烈抑制，而葡萄糖激酶不受6-磷酸葡萄糖的抑制。——上述描述，请你说明两种酶在调节上的特点是什么？ 4． 请解释什么是酶的活力和酶的比活力，并说出活力的比活力两个指标在酶的纯化过程中分别可以反映什么？ 5． 写出葡萄糖酵解生成丙酮酸过程中的步骤（写出九步即可）。（A卷此题不同，大概是脂肪肝的病机） 6． 写出氧化磷酸化的五个作用部位不同的抑制剂，并写出各处的抑制部位。 7． 真核生物mRNA的3'末端有一段poly（A），5'末端有一个“帽子”，“帽子”的结构特点是什么？ 8． 5-磷酸核糖-1-焦磷酸（PRPP）是一个重要的代谢中间物，试举出二个反应合例子。 9． 试列出tRNA分子上与多肽合成有关的位点。 10。真核生物转录前水平的基因调节主要有哪些方式？中国科学院研究生院2002年硕士研究生入学考试 科目名称：生物化学与分子生物学（答案） 一、判断题 1 - 2 - 3 - 4 - 5 + 6 - 7 - 生成溶血磷脂 8 - 9 + 10 - 11 12 -有的为RNA->RNA 13 - 14 + 15 - 二、选择题 1 C 2 B 3 C 4 A 5 C 6 C 7 D 8 C 9 B 10 A 11 D 12 B 13 B 14 A 15 C 16 B 17 C 18 A 19 B 20 A 三、填空题 1、αα、ββ、βαβ 2、抗原抗体结合的专一性 3、低温 干燥 4、糖蛋白（阴离子交换蛋白） 5、多聚阴离子 抗凝血 6、snoRNA 7、增色效应 8、平末端 9、光面内质网 脂质 胆固醇 四、简答题 1、不带电荷的极性氨基酸、带正电荷的极性氨基酸、带负电荷的极性氨基酸、非极性氨基酸。 2、（1）末端端修饰 细菌的多肽N末端都是甲酰甲硫氨酸，真核生物的多肽N末端都是甲硫氨酸，通常N末端的甲酰甲硫氨酸或甲硫氨酸以及更多的N末端氨基酸残基都要被除去。真核生物的多肽的N末端残基还要进一步的乙醇化。羧基端的再修饰也时有发生。 （2）切除信号序列。 （3）非末端氨基酸的修饰 丝氨酸、苏氨酸残基的磷酸化；赖氨酸、谷氨酸残基的甲基化；谷氨酸、天冬氨酸的羧基化。 （4）糖基化工厂 糖蛋白的末冬酰氨，丝氨酸、苏氨酸和糖基结合。 （5）附加异戊二烯基团。许多真核生物蛋白质的半胱氨酸残基和异戊二烯基团以硫醚键结合。 （6）添加辅基 这些辅基和解键共价结合，如血红素，叶绿素、生物素等。 （7）前体修饰。有些蛋白生物合成时是以前体蛋白或多蛋白形式出现的要通过蛋白酶的切割，成为较小的活性分子。 （8）形成二硫键 3、同一种底物的同一种反应，有两种酶存在，但两种酶的活性调节能力不同：已糖激酶对6-碳糖不加选择，肌肉中的已糖激酶为别构酶，特别受其产物6-磷酸葡萄糖的强烈负反馈抵制；葡萄糖激酶则对D-葡萄糖有专一性，为诱导酶，活性不被6-磷酸葡萄糖抑制，在进食后血糖升高时，可以促使葡萄糖转变成糖原储存起来。 4、酶活力也叫酶活性，可以用酶活力单位表示，酶活力是由酶自身催化一定反应的的能力决定的，比活力是指单位质量的酶制剂的酶活力单位数，酶的比活力反应酶的纯度。 5、生化下P67 6、生化下P129 7、真核生物mRNA的5'端有一个帽子结构。这一结构的最大特点是7-甲基鸟嘌呤核苷和mRNA的5'端通过5'-5'三磷酸酯键相连，另外靠近这一帽子结构的第一和第二核苷酸的2„羟基甲基化；真核mRNA的3„末端有一个多聚A尾，这些结构都是转录后加上去的。 8、生化下P393 P397 9、有4个关键的位点 （1）反密码子 （2）携带氨基酸的3‟末端的氨基酸臂 （3）和核糖体上的蛋白质相互作用的二氢鸟嘧啶环和TΨC环 （4）氨酰t-RNA合成酶的结合位点 10、生化下P571
2014兰州大学细胞生物学考研复习精编 含真题与答案 在文博兰大那边有。
复习资料很多，下面的只是一部分第一章 绪论细胞生物学从显微水平、超微水平和分子水平等不同层次研究细胞结构、功能及生活史。细胞生物学由细胞学Cytology发展而来，Cytology是指对细胞形态（特别是染色体形态）的观察。在我国的基础学科发展规划中，细胞生物学与分子生物学，神经生物学和生态学并列为生命科学的四大基础学科。第一章 绪论本章内容提要:第一节 细胞生物学研究的内容与现状一、 细胞生物学是现代生命科学的重要基础学科二、细胞生物学的主要研究内容三、当前细胞生物学研究的总趋势与重点领域第二节 细胞学与细胞生物学发展简史附录 细胞生物学参考书:第一节 细胞生物学研究的内容与现状一、 细胞生物学是现代生命科学的重要基础学科生命体是多层次、非线性、多侧面的复杂结构体系，而细胞是生命体的结构与生命活动的基本单位，有了细胞才有完整的生命活动。细胞生物学 是研究细胞基本生命活动规律的科学，它是在不同层次（显微、亚显微与分子水平）上以研究细胞结构与功能、细胞增殖、分化、衰老与凋亡、细 胞信号传递、真核细胞基因表达与调控、细胞起源与进化等为主要内容。核心问题是将遗传与发育在细胞水平上结合起来。二、细胞生物学的主要研究内容1、细胞核、染色体以及基因表达的研究2、生物膜与细胞器的研究3、细胞骨架体系的研究4、细胞增殖及其调控5、细胞分化及其调控6、细胞的衰老与凋亡7、细胞的起源与进化8、细胞工程三、当前细胞生物学研究的总趋势与重点领域1、细胞生物学研究的总趋势细胞生物学与分子生物学(包括分子遗传学与生物化学) 相互渗透与交融是总的发展趋势；当前细胞生物学研究中的三大基本问题:（1）、细胞内基因组是如何在时间和空间上有序表达的？（2）、基因表达产物----主要是结构蛋白、核酸、脂质、多糖及其复合物，他们如何逐级装备成能行使生命活动的基本结构体系及各种细胞器？（3）、基因表达产物----主要是大量活性因子与信号分子，他们是如何调节细胞最重要的生命活动过程的？2 、当前细胞基本生命活动研究中的重要领域:（1）、染色体DNA与蛋白质相互作用关系-----主要是非组蛋白对基因组的作用；（2）、细胞增值、分化、凋亡的相互关系及其调控；（3）、细胞信号转导的研究；（4）、细胞结构体系的装配。3、细胞重大生命活动的相互关系第二节 细胞学与细胞生物学发展简史一、生物科学发展的三个阶段:1.形态描述生物学时期，19世纪以前；2.实验生物学时期，20世纪前半世纪；3.分子生物学时期，20世纪50-60年代至今。二、细胞生物学发展简史1. 细胞的发现2. 细胞学说的建立其意义细胞学说内容:1） 认为细胞是有机体，一切动植物都是由细胞发育而来,并由细胞和细胞产物所构成；2） 每个细胞作为一个相对独立的单位，既有它“自己的”生命,又对与其它细胞共同组成的整体的生命有所助益；3） 新的细胞可以通过老的细胞繁殖产生。3. 细胞学的经典时期1）原生质理论的提出2）细胞分裂的研究3）重要细胞器的发现4. 实验细胞学与细胞学的分支及其发展1）细胞遗传学的发展2）细胞生理学的研究3）细胞化学5. 细胞生物学学科的形成与发展三、细胞学说Jean-Baptiste de Lamark （1744~1829)，获得性遗传理论的创始人，法国退伍陆军中尉，50岁成为巴黎动物学教授，1809年他认为只有具有细胞的机体，才有生命。Charles Brisseau Milbel（1776~1854)，法国植物学家，1802年认为植物的每一部分都有细胞存在， Henri Dutrochet （1776~1847），法国生理学家，1824年进一步描述了细胞的原理，Matthias Jacob Schleiden（1804~1881)，德国植物学教授，1838年发表“植物发生论”(Beitr?ge zur Phytogenesis)，认为无论怎样复杂的植物都有形形色色的细胞构成。Theodor Schwann（1810~1882)，德国解剖学教授，一开始就研究Schleiden的细胞形成学说，并于1838年提出了“细胞学说”（Cell Theory)这个术语；1939年发表了“关于动植物结构和生长一致性的显微研究”Schwann提出:有机体是由细胞构成的；细胞是构成有机体的基本单位。1855 德国人R. Virchow 提出“一切细胞来源于细胞”（omnis cellula e cellula）的著名论断；进一步完善了细胞学说。把细胞作为生命的一般单位，以及作为动植物界生命现象的共同基础的这种概念立即受到了普遍的接受。恩格斯将细胞学说誉为19世纪的三大发现之一第二章 细胞基本知识概要本章内容提要:第一节 细胞的基本概念第二节 非细胞形态的生命体-------病毒及其与细胞的关系第三节 原核细胞与古核细胞第四节 真核细胞基本知识概要第一节 细胞的基本概念一、细胞是生命活动的基本单位1、一切有机体都由细胞构成，细胞是构成有机体的基本单位；2、细胞具有独立的、有序的自控代谢体系，细胞是代谢与功能的基本单位3、细胞是有机体生长与发育的基础4、细胞是遗传的基本单位，细胞具有遗传的全能性5、没有细胞就没有完整的生命二、细胞的基本共性1.所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质构成的生物膜，即细胞膜。2.所有的细胞都含有两种核酸:即DNA与RNA作为遗传信息复制与转录的载体。3.作为蛋白质合成的机器—核糖体，毫无例外地存在于一切细胞内。4.所有细胞的增殖都以一分为二的方式进行分裂。第二节 非细胞形态的生命体 —病毒及其与细胞的关系一、病毒与细胞在起源与进化中的关系病毒是非细胞形态的生命体，它的主要生命活动必须要在细胞内实现。病毒与细胞在起源上的关系，目前存在3种主要观点:1.生物大分子→病毒→细胞 病毒2.生物大分子 细胞3.生物大分子→细胞→病毒现在来说，第二种观点和第三种观点比较容易接受，而且第三种观点越来越有说服力。认为病毒是细胞演化的产物的观点主要依据如下:彻底的寄生性；病毒核酸与哺乳动物细胞DNA某些片断的相似性；病毒可以看成是核酸与蛋白质形成的复合大分子。第三节 原核细胞与古核细胞一、Basic characteristics of Prokaryotic cell1. 遗传的信息量小，遗传信息载体仅由一个环状DNA或RNA构成；2. 细胞内没有分化为以膜为基础的具有专门结构与功能的细胞器和细胞核膜。二、原核细胞的主要代表1、支原体为什么说支原体是一个细胞（1）能在培养基上生长，具有典型的细胞膜；（2）具有环状的双螺旋DNA作为遗传信息量的载体；（3）mRNA与核糖体结合形成多聚核糖体，指导蛋白质的合成；（4）以一分为二的方式分裂繁殖。支原体是最小、最简单的细胞。2、细菌1）、细菌的三种形态:球状、杆状和螺旋状2)、细菌细胞的核区与基因组:细菌的核区实际主要由一个环状的DNA分子组成；现在也可以把细菌的环状DNA理解为细菌基因组。3）、细菌细胞的表面结构:A. 细胞膜:主要功能是选择性的交换物质----吸收营养物质，排出代谢废物，并且有分泌与运输蛋白的作用。B. 细胞壁: 所有细菌的细胞壁的共同成分是肽聚糖，由乙酰氨基葡萄糖、乙酰胞壁酸与四五个氨基酸短肽聚合而成的多层网状大分子结构。C. 细胞壁特化结构:a. 中膜体-----细胞膜内陷而形成的；b. 荚膜-----是一层松散的粘液物质，有一定程度的保护作用；c. 鞭毛-----细菌的运动器官，与真核生物的鞭毛不同，它是由一种称为鞭毛蛋白的弹性蛋白所构成。4）、细菌细胞的核糖体——部分附着在细胞膜内侧，大部分游离于细胞质中，与蛋白质的合成密切相关。5）、细菌细胞核外DNA------质粒，是裸露环状DNA，在遗传工程研究中很重要。6）、细菌细胞的内生孢子，即芽孢，是细菌对不良环境或营养耗尽时的反应。3. 蓝藻细胞:是最简单的自养植物类型之一。基本特征:1）中心质------相当于细菌的核区，是遗传物质DNA所在部位。2）光合片层-----位于细胞质部分，是同心环状的膜片层结构，上边附着有藻胆蛋白体（包括藻蓝蛋白，一藻蓝蛋白和藻红蛋白），能够把光能传递给叶绿素a，进行原始光和作用。3）细胞质内含物4）细胞表面结构5）细胞分裂四、原核细胞与真核细胞的比较1、原核细胞与真核细胞最根本的区别 :（1）、细胞膜系统的分化和演变。 细胞内部结构和职能的分工是真核细胞区别于原核细胞的重要标志。（2）、遗传信息量与遗传装置的扩增与复杂化。 遗传信息重复序列与染色体多倍性的出现是真核细胞区别于原核细胞的另一重要标志。（3）、真核细胞内，遗传信息的转录与翻译有严格的阶段性和区域性，而在原核细胞内则是转录与翻译可以同时发生五、原核细胞与真核细胞基本特征的比较（p36)六、原核细胞与真核细胞的遗传结构装置和基因表达的比较(p37)七、古细菌古细菌（archaebacteria）与真核细胞曾在进化上有过共同历程主要证据（1）细胞壁的成分与真核细胞一样，而非由含壁酸的肽聚糖构成，因此抑制壁酸合成的链霉素， 抑制肽聚糖前体合成的环丝氨酸，抑制肽聚糖合成的青霉素与万古霉素等对真细菌类有强的抑制生长作用，而对古细菌与真核细胞却无作用。（2）DNA与基因结构:古细菌DNA中有重复序列的存在。此外，多数古核细胞的基因组中存在内含子。（3）有类核小体结构:古细菌具有组蛋白，而且能与DNA构建成类似核小体结构。（4）有类似真核细胞的核糖体:多数古细菌类的核糖体较真细菌有增大趋势，含有60种以上蛋白，介于真核细胞（70～84）与真细菌（55）之间。抗生素同样不能抑制古核细胞类的核糖体的蛋白质合成。（5）5S rRNA:根据对5S rRNA的分子进化分析，认为古细菌与真核生物同属一类，而真细菌却与之差距甚远。5S rRNA二级结构的研究也说明很多古细菌与真核生物相似。第四节 真核细胞基本知识概要一、真核细胞的基本结构体系1.生物膜系统:以脂质及蛋白质成分为基础的生物膜结构系统；2.遗传信息表达结构系统:以核酸（DNA或RNA）与蛋白质为主要成分的遗传信息表达系统3.细胞骨架系统:由特异蛋白分子装配构成的细胞骨架系统。二、细胞的大小及其分析各类细胞直径的比较三、植物细胞与动物细胞的比较植物细胞特有的结构: 1. 细胞壁 2. 液泡 3. 叶绿体第三章 细胞生物学研究方法本章内容提要：第一节 细胞形态结构的观察方法第二节 细胞组分的分析方法第三节 细胞培养、细胞工程与显微操作技术第一节 细胞形态结构的观察方法一、光学显微镜技术（一）普通光学显微镜? 1. 构成：? ①照明系统? ②光学放大系统? ③机械装置? 2. 原理：经物镜形成倒立实像，经目镜进一步放大成像。? 3. 分辨率：指分辨物体最小间隔的能力。（二）荧光显微镜 Fluorescence microscope特点：光源为紫外线，波长较短，分辨力高于普通显微镜；有两个特殊的滤光片；照明方式通常为落射式。用于观察能激发出荧光的结构。用途：免疫荧光观察、基因定位、疾病诊断。（三）激光共聚焦扫描显微境Laser confocal scanning microscope, LCSM用激光作光源，逐点、逐行、逐面快速扫描。能显示细胞样品的立体结构。分辨力是普通光学显微镜的3倍。用途类似荧光显微镜，但能扫描不同层次，形成立体图像。（四）相差显微镜? 把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处。? 环形光阑（annular diaphragm）：位于光源与聚光器之间。? 相位板（annular phaseplate）：物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ。原理用途：观察未经染色的玻片标本（五）微分干涉差显微镜 Differential interference contrast microscope （DIC）? 1952年，Nomarski发明，利用两组平面偏振光的干涉，加强影像的明暗效果，能显示结构的三维立体投影。标本可略厚一点，折射率差别更大，故影像的立体感更强。二、电子显微镜1、电子显微镜的基本知识电镜与光镜的比较显微镜 分辨本领 光源 透镜 真空 成像原理LM 200nm 可见光（400-700） 玻璃透镜 不要求真空 利用样品对光的吸收形成明暗反差和颜色变化100nm 紫外光（约200nm) 玻璃透镜 不要求真空TEM 0.1nm 电子束（0.01-0.9） 电磁透镜 要求真空 利用样品对电子的散射和透射形成明暗反差2、 原理? 以电子束作光源，电磁场作透镜。电子束的波长短，并且波长与加速电压(通常50~120KV)的平方根成反比。? 由电子照明系统、电磁透镜成像系统、真空系统、记录系统、电源系统等5部分构成。? 分辨力0.2nm，放大倍数可达百万倍。? 用于观察超微结构（ultrastructure），即小于0.2μm、光学显微镜下无法看清的结构，又称亚显微结构（submicroscopic structures）。3、主要电镜制样技术? 1）超薄切片? 电子束穿透力很弱，用于电镜观察的标本须制成厚度仅50nm的超薄切片，用超薄切片机（ultramicrotome）制作。? 通常以锇酸和戊二醛固定样品，丙酮逐级脱水，环氧树脂包埋，以热膨胀或螺旋推进的方式切片，重金属（铀、铅）盐染色。? 2）负染技术用重金属盐(如磷钨酸)对铺展在载网上的样品染色；吸去染料，干燥后，样品凹陷处铺了一层重金属盐，而凸的出地方没有染料沉积，从而出现负染效果，分辨力可达1.5nm左右。3）冰冻蚀刻 freeze-etching? 亦称冰冻断裂。标本置于干冰或液氮中冰冻。然后断开，升温后，冰升华，暴露出了断面结构。向断裂面上喷涂一层蒸汽碳和铂。然后将组织溶掉，把碳和铂的膜剥下来，此膜即为复膜（replica）。三、扫描隧道显微镜scanning tunneling microscope，STM? 原理：根据隧道效应而设计，当原子尺度的针尖在不到一个纳米的高度上扫描样品时，此处电子云重叠，外加一电压（2mV~2V），针尖与样品之间形成隧道电流。电流强度与针尖和样品间的距离有函数关系，将扫描过程中电流的变化转换为图像，即可显示出原子水平的凹凸形态。? 分辨率：横向为0.1~0.2nm，纵向可达0.001nm。? 用途：三态（固态、液态和气态）物质均可进行观察。第二节 细胞组分的分析方法一、离心分离技术用途：于分离细胞器与生物大分子及其复合物转速为10~25kr/min的离心机称为高速离心机。转速>25kr/min，离心力>89Kg者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100000r/min，离心力超过500Kg。（一）差速离心 Differential centrifugation? 特点：– 介质密度均一；– 速度由低向高，逐级离心。? 用途：分离大小相差悬殊的细胞和细胞器。? 沉降顺序：核——线粒体——溶酶体与过氧化物酶体——内质网与高基体——核蛋白体。? 可将细胞器初步分离，常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。（二）密度梯度离心? 用介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过离心力场的作用使细胞分层、分离。? 类型：速度沉降（velocity sedimentation）、等密度沉降（isopycnic sedimentation）。? 常用介质：氯化铯、蔗糖、多聚蔗糖。? 分离活细胞的介质要求：– 1）能产生密度梯度，且密度高时，粘度不高；– 2）PH中性或易调为中性；– 3）浓度大时渗透压不大；– 4）对细胞无毒。二、 细胞内核酸、蛋白质、酶、糖与脂类等的显示方法?原理：利用一些显色剂与所检测物质中一些 特殊基团特异性结合的特征，通过显 色剂在细胞中的定位及颜色的深浅来判断某种物质在细胞中的分布和含量。Feulgen Staining三、特异蛋白抗原的定位与定性1、免疫荧光技术： 快速、灵敏、有特异性，但其分辨率有限2、蛋白电泳(SDS-PAGE)与免疫印迹反应(Western-Blot)3、免疫电镜技术：?免疫铁蛋白技术?免疫酶标技术应用：通过对分泌蛋白的定位，可以确定某种蛋白的分泌动态；胞内酶的研究；膜蛋白的定位与骨架蛋白的定位等四、细胞内特异核酸的定位与定性?光镜水平的原位杂交技术（同位素标记或荧光素标记的探针）?电镜水平的原位杂交技术（生物素标记的探针与抗生物素抗体相连的胶体金标记结合）?PCR技术五、放射自显影技术1、原理及应用：?利用同位素的放射自显影，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究；?实现对细胞内生物大分子进行动态和追踪研究。2、步骤：?前体物掺入细胞（标记：持续标记和脉冲标记）———放射自显影六、定量细胞化学分析技术1、显微分光光度术（Microspectrophotometry）?利用细胞内某些物质对特异光谱的吸收，测定这些物质（如核酸与蛋白质等）在细胞内的含量。包括： 紫外光显微分光光度测定法可见光显微分光光度测定法? 流式细胞仪（Flow Cytometry）?主要应用：用于定量测定细胞中的DNA、RNA或某一特异蛋白的含量；测定细胞群体中不同时相细胞的数量；从细胞群体中分离某些特异染色的细胞；分离DNA含量不同的中期染色体。第三节 细胞培养、细胞工程与显微操作技术一、细胞的培养1、动物细胞培养（1） 类型：A 原代培养细胞（primary culture cell)---从机体取出后立即 培养的细胞。1-10代以内的细胞培养称为原代培养细胞。B 继代培养细胞（sub-culture cell）---适宜在体外培养条件下持续传代培养的细胞称为传代培养细胞(2) 细胞株（cell strain） 正常二倍体，接触抑制.10~50代(3) 细胞系（cell line） 亚二倍体或非整倍体，接触抑制丧失，容易传代培养。50代以后。2、植物细胞（1）、 原生质体培养 （体细胞培养）（2）、单倍体细胞培养（花药培养）3、非细胞体系（cell-free system）：只来源于细胞，而不具有完整的细胞结构，但包含了进行正常生物学反应所需的物质组成体系。二、细胞工程1、细胞工程：在细胞水平上有计划的保存、改变和创造细胞遗传物质，以产生新的物种和品系，或大规模培养组织细胞以获得生物产品。其所使用的技术主要是：细胞培养、细胞分化的定向诱导、细胞融合与显微注射。2、细胞融合（cell fusion）与细胞杂交（cell hybridization）技术? 用人工方法把同种或不同种的两个或两个以上的细胞，通过介导物作用，融合成一个细胞的技术。亦称细胞杂交（cell hybridization）? 同核融合细胞? 异核融合细胞3、单克隆抗体（monoclone antibody）技术单克隆抗体技术? 正常淋巴细胞（如小鼠脾细胞）具有分泌抗体的能力，但不能长期培养，瘤细胞（如骨髓瘤）可以在体外长期培养，但不分泌抗体。于是英国人Kohler和Milstein 1975将两种细胞杂交而创立了单克隆抗体技术，获1984年诺贝尔奖。第四章 细胞质膜与细胞表面第一节 细胞质膜与细胞表面特化结构第二节 细胞连接第三节 细胞外被与细胞外基质第一节 细胞质膜与细胞表面特化结构? 细胞膜(cell membrane)又称质膜（plasma membrane），是指围绕在细胞最外层，由脂质和蛋白质组成的生物膜。细胞膜只是真核细胞生物膜的一部分，真核细胞的生物膜（biomembrane）包括细胞的内膜系统（细胞器膜和核膜）和细胞膜（cell membrane）。一、细胞膜的结构模型1、结构模型1） 三明治质膜结构模型: E.Gorter和F．Grendel（1925）, 提出 “protein-lipid-protein”三夹板或三明治质膜结构模型，这一模型影响20年之久。2） 单位膜模型(unit membrane model)：J.D.Robertson（1959年），提出单位膜模型，大胆的推断所有的生物膜都是由蛋白质-脂类-蛋白质单位膜构成，在电镜下观察，细胞膜显示出 暗---亮----暗三条带，两侧的暗带的厚度约2nm, 推测是蛋白质，中间的亮带厚度约3.5nm，推测是脂双层分子。整个膜的厚度约是7.5nm。3） 流动镶嵌模型(fluid mosaic model)： S.J.Singer和G.Nicolson（1972），提出生物膜的流动镶嵌模型(fluid mosaic model)，这种模型认为细胞膜是由脂质双分子层组成，蛋白质以不同的方式，镶嵌，覆盖或横跨双分子层。流动镶嵌模型强调了，a 膜的流动性，b 膜蛋白分布的不对称性。4） 脂筏模型（lipid rafts model）： K.Simons et al(1997)，提出了脂筏模型（lipid rafts model）Functional rafts in Cell membranes. Nature 387:569-572。2、生物膜结构目前对生物膜结构的认识可以归纳如下:1）磷脂双分子层是组成生物膜的基本结构成分,尚未发现膜结构中起组织作用的蛋白；2）蛋白分子以不同方式镶嵌在脂双层分子中或结合在其表面, 膜蛋白是赋予生物膜功能的主要决定者；3）生物膜可以看成是蛋白质在双层脂分子的二维溶液。二、生物膜的组成成分（一）、膜脂成分：膜脂主要包括磷脂、糖脂和胆固醇三种类型。? 1、磷脂：1）膜脂的基本成分（50％以上）? 2）分为二类: a 甘油磷脂（磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇）? b 鞘磷脂? 3) 主要特征：①具有一个极性头和两个非极性的尾(脂肪酸链) （心磷脂除外）；? ②脂肪酸碳链为偶数,多数碳链由16,18或20个组成；? ③既具有饱和脂肪酸(如软脂酸)又有不饱和脂肪酸(如油酸)；? 2、糖脂：糖脂普遍存在于原核和真核细胞的质膜上（5％以下）,神经细胞糖脂含量较高；? 3、胆固醇： 1）胆固醇存在于真核细胞膜上（30%以下），细菌质膜不含有胆固醇，但某些细菌的膜脂中含有甘油脂等中性脂类。? 2）胆固醇的作用：? ① 调节膜的流动性；? ② 增加膜的稳定性；? ③ 降低水溶性物质的通透性。（二）、膜脂的运动方式? 1、侧向运动： 沿膜平面的侧向运动（基本运动方式）? 2、自旋运动： 脂分子围绕轴心的自旋运动；? 3、 摆 动： 脂分子尾部的摆动；? 4、 翻转运动：双层脂分子之间的翻转运动，发生频率还不到脂分子侧向交换频率的? 10－10。但在内质网膜上,新合成的磷脂分子翻转运动发生频率很高。�? 1、定义：脂质体是根据磷脂分子可在水相中形成稳定的脂双层膜的趋势而制备的人工膜。三、膜蛋白（二）、膜内在蛋白与膜脂结合的方式1、膜蛋白的跨膜结构域与脂双层分子的疏水核心的相互作用。2、跨膜结构域两端携带正电荷的氨基酸残基与磷脂分子带负电的极性头形成离子键，或带负电的氨基酸残基通过Ca2+、Mg2+等阳离子与带负电的磷脂极性头相互作用。3、某些膜蛋白在细胞质基质一侧的半胱氨酸残基上共价结合脂肪酸分子,插入脂双层之间,进一步加强膜蛋白与脂双层的结合力,还有少数蛋白与糖脂共价结合。（三）、去垢剂1、定义：去垢剂是一端亲水、另一端疏水的两性小分子,是分离与研究膜蛋白的常用试剂。四、膜的流动性(sk)（一）、膜脂的流动性膜脂的流动性主要由1 脂分子本身的性质决定的,脂肪酸链越短, 不饱和程度越高,膜脂的流动性越大。2 温度对膜脂的运动有明显的影响。3 在细菌和动物细胞中常通过增加不饱和脂肪酸的含量来调节膜脂的相变温度以维持膜脂的流动性。4 在动物细胞中，胆固醇对膜的流动性起重要的双向调节作用。（二）、 膜蛋白的流动�荧光抗体免疫标记实验�成斑现象(patching)或成帽现象(capping) �（三）、膜的流动性受多种因素影响；细胞骨架不但影响膜蛋白的运动，也影响其周围的膜脂的流动。膜蛋白与膜脂分子的相互作用也是影响膜流动性的重要因素荧光抗体免疫标记实验（二）、膜脂与糖脂的不对称性�? 膜脂的不对称性：指同一种膜脂分子在膜的脂双层中呈不均匀分布；? 糖脂的不对称性：糖脂分子仅存在于质膜的ES面，是完成其生理功能的结构基础
我有哦 。。。。生态学和 细胞生物学 的历年真题
2012年兰州大学616细胞生物学考研试题（回忆版）一．名词解释（每个4分，共十个）1.膜骨架2.受体介导的胞吞作用3.细胞色素C4.TGN5.细胞通讯6.分子马达7.MTOC8.extracellular matrix9anchoring junction 10 protein sorting 二、实验应用（20分）1.检验细胞凋亡方法有哪些？对2种方法的原理做详细说明。（10分）2.有一已知序列的基因，试设计实验过程，证明其编码的产物定位在某真核生物组织的细胞核中。（10分）三．回答问题（90分）1.细胞膜上的多次跨膜运输蛋白石怎样形成的？试列举说明其生物学意义。（15分）2.用于细胞生物学研究的模式生物油哪些？举两例说明其主要研究价值。（10分）3.说明核孔复合体的结构和功能？（15分）4.何为癌基因育抑癌基因？举例说明其对细胞周期的调控作用（10分）5.减数分裂有哪些特有的特征？（10分）6说明核糖体rRNA的功能？（10分）7．微管有哪些功能？（10分）8说明溶酶体的发生和功能？（10分）给你个2012年的看看对与不对，详细内容>>文博兰大考研>>复习指导>>专业课复习
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一、是非题：15题，每题1分，共15分。答"是"写"+"，答"非"写"- "，写在题后的（）中。 1．维生素对人体的生长和健康是必需的，但人体不能合成维生素。 （ ） 2．能被某种振奋分子识别，并与其特异和共价结合的原子，原子团和分子，称为配基。 （ ） 3．当不同分子大小的蛋白质混合物流经凝胶柱层析时，小分子物质因体积小最先被洗脱出来。 （ ） 4．酶的最适pH与酶的等电点是两个不同的概念，但两者之间有相关性，两值通常比较接近或相同。 （ ） 5．对于一个酶而言，其过渡态的底物类似物与底物的物相比较，是更有效的竞争性抑制剂。 （ ） 6．Km值是酶的牲常数之一，与酶浓度、pH值、离子强度等条件或因素无关。 （ ） 7．磷脂酶A水解脂生成磷脂酸。 （ ） 8．NAD 不能由细胞浆通过线粒体内膜进入线柆体内，而NADH能在通过线粒体内膜后被氧化。 （ ） 9．寡霉素是线粒体ATP合成酶的抑制剂。 （ ） 10．核苷磷酸化酶催化腺苷的磷酸化，生成腺嘌呤和核糖-5-磷酸。 （ ） 12．肿瘤RNA病毒的复制过程为RNA->DNA->RNA。 （ ） 13．肾上腺素能与细胞膜上专一受体结合，这种激素 受体复合物能直接活化环化酶，使细胞cAMP浓度增加，引起级联反应。 （ ） 14．维生素E是一种抗氧化剂，对线体膜上的磷脂有抗自由的作用。 （ ） 15．吡哆醛、吡哆胺和吡哆醇的磷酸酯都可以作为转氨的辅酶。 （ ） 二、选择题：20题，每题1分，共20分。请将选择答案的号码填入（）中。 1．为稳定胶原三股螺旋结构，三联体的每三个氨基酸的位置必须是： （ ） ①丙氨酸； ②谷氨酸； ③甘氨酸 2．分离含胡二硫键的肽段可以用： （ ） ①SDS-PAGE电泳； ②对角线电泳； ③琼脂糖电泳 3．引起疯牛病（牛海绵脑病）的病原体是： （ ） ①一种DNA； ②一种RNA； ③一种蛋白质； ④一种多糖 4．胰岛素等激素的受体以及上成或表皮生长因子的受体都是一种： （ ） ①激酶； ②脱氢酶； ③转氨酶 5．在酶的可逆抑制剂中，不影响酶的二级常数（Kcat/Km）的是： （ ） ①竞争性抑制剂； ②非竞争性抑制剂； ③反竞争性抑制剂； ④都不是 6．“多酶体系”是指一个代谢过程中几个酶殗了一个反应链体系，多酶体系中的酶通常具有以下性质。 （ ） ① 只是在功能上相互有联系，在结构上互不相关，不存在相互作用； ② 不仅在功能上相互有联系，在结构上也有相互联系，形成复合体； ③ 上述两种情况都存在。 7．所谓“代谢物”指的是下面哪一条？ （ ） ① 特指代谢反应中的反应物； ② 特指代谢反应中的产物； ③ 特指代谢反应中的中间物； ④ 所有代谢反应中的反应物、中间物和产物都称为代谢物。 8．有的酶存在多种同工酶形式，这些同工酶所催化的反应： （ ） 中国科学院研究生院历年招收攻读硕士学位研究生入学统一考试试题 科目名称：生物化学与分子生物学 5 ① 并不完全相同； ② 完全相同，而且反应的平衡常数也相同； ③ 完全相同，但由于每种同工酶活性不同，反应平衡常数可以不相同。 9．脂肪肝是一种代谢疾病，它的产生主要是由于： （ ） ① 肝脏脂肪水解代谢障碍； ② 肝脏蛋白不能及时将肝细胞脂肪排出； ③ 肝脏细胞摄取过多游离脂肪酸； ④ 肝脏细胞膜脂肪酸载体异常 10．线粒体ATP/ADP交换载体在细胞内的作用是： （ ） ① 需能传送； ② 促进传送； ③ ATP、ADP的通道； ④ ATP水解酶 11．辅酶Q是线粒体内膜： （ ） ① NADH脱氢酶的辅酶； ② 琥珀酸脱氢酶的辅酶； ③ 二羧酸载体； ④ 呼吸链的氢载体 12．线粒体蛋白的跨膜传送是一种： （ ） ① 类似细胞膜的吞噬作用； ② 蛋白质解折叠后传送； ③ 通过对各个蛋白质专一的载体传送； ④ 膜内外同类蛋白质交换 13．Poly d（A-T）的Tm值较poly d（G C）为： （ ） ① 高； ②低； ③相同 14．反密码子为IGC，可识别密码子： （ ） ① GCA；； ②GCG；； ③ACG 15．RNA形成二级结构的碱基对，除了A-U和G-C外，还有： （ ） ① A C ②A G ③G U 16．RNA用强碱水解，产生： （ ） ① 2'和5'核苷酸混合物； ② 2'和3'核苷酸混合物； ③ 3'和5'核苷酸混合物； 17．能与受体结合，形成激素 受体复合物，进入细胞核调节基因表达的激素是： （ ） ① 甲状腺素 ② 肾上腺素； ③ 溏皮质激素； ④ 前列腺素 18．原核生物基因转终止子在终止点前均有： （ ） ① 回文结构； ② 多聚A序列； ③ TATA序列； ④ 多聚T序列 19．能专门水解DNA RNA杂交分子中RNA的酶是 （ ） ① DNA聚合酶I； ② 逆转录酶； ③ Rnase A； ④ 核酸外切酶III 20．真核生物中，存在于核仁中的RNA聚合酶是： （ ） ① RNA聚合酶I； ②RNA聚合酶II； ③RNA聚合酶III 三、填空题：9题，每空格答对1分，共15分 1． 已知三种超二级结构的基本组合形式______，______，______。 2． Western印迹法的原理是用______鉴定蛋白质的一种方法。 3． 酶容易失活，如何保存酶制品是一个很重要的问题。通常酶制品的保存方法有______和______等。 4． 红细胞膜带3蛋白是一种______。 5． 肝素是一种________，它的主要药理作用是________。 6． 细胞核内除了DNA外，还发现至少有二类小分子RNA，它们是核小分子RNA和________。 7． 核酸变性时，紫上吸收值增高，叫________效应。 8． 限制性内切酶特异识别和切割DNA分子中的回文结构，形成末端有粘性末端和________末端。 中国科学院研究生院历年招收攻读硕士学位研究生入学统一考试试题 科目名称：生物化学与分子生物学 6 9． 内质网分为两种类型，一种是粗糙内质网，为________的场所；另一种为光滑型内质网，与________和________合成有关。 四、问答题：10题，每题5分，共50分。 1． 根据氨基酸通式的R基团极性性质，20种常见的氨基酸可分成哪四类？ 2． 简述蛋白质翻译后的加工过程。 3． 葡萄糖酵解过程的第一步是葡萄糖磷酸化形成6-磷酸葡萄糖，催化这一步反应有两种酶，已糖激酶和葡萄糖激酶。己糖激酶对葡萄糖的Km值远低于平时细胞内葡萄糖浓度，而葡萄糖激酶的Km值比较接近平时细胞内葡萄糖浓度。此外，己糖激酶受6-磷酸葡萄糖强烈抑制，而葡萄糖激酶不受6-磷酸葡萄糖的抑制。——上述描述，请你说明两种酶在调节上的特点是什么？ 4． 请解释什么是酶的活力和酶的比活力，并说出活力的比活力两个指标在酶的纯化过程中分别可以反映什么？ 5． 写出葡萄糖酵解生成丙酮酸过程中的步骤（写出九步即可）。（A卷此题不同，大概是脂肪肝的病机） 6． 写出氧化磷酸化的五个作用部位不同的抑制剂，并写出各处的抑制部位。 7． 真核生物mRNA的3'末端有一段poly（A），5'末端有一个“帽子”，“帽子”的结构特点是什么？ 8． 5-磷酸核糖-1-焦磷酸（PRPP）是一个重要的代谢中间物，试举出二个反应合例子。 9． 试列出tRNA分子上与多肽合成有关的位点。 10。真核生物转录前水平的基因调节主要有哪些方式？中国科学院研究生院2002年硕士研究生入学考试 科目名称：生物化学与分子生物学（答案） 一、判断题 1 - 2 - 3 - 4 - 5 + 6 - 7 - 生成溶血磷脂 8 - 9 + 10 - 11 12 -有的为RNA->RNA 13 - 14 + 15 - 二、选择题 1 C 2 B 3 C 4 A 5 C 6 C 7 D 8 C 9 B 10 A 11 D 12 B 13 B 14 A 15 C 16 B 17 C 18 A 19 B 20 A 三、填空题 1、αα、ββ、βαβ 2、抗原抗体结合的专一性 3、低温 干燥 4、糖蛋白（阴离子交换蛋白） 5、多聚阴离子 抗凝血 6、snoRNA 7、增色效应 8、平末端 9、光面内质网 脂质 胆固醇 四、简答题 1、不带电荷的极性氨基酸、带正电荷的极性氨基酸、带负电荷的极性氨基酸、非极性氨基酸。 2、（1）末端端修饰 细菌的多肽N末端都是甲酰甲硫氨酸，真核生物的多肽N末端都是甲硫氨酸，通常N末端的甲酰甲硫氨酸或甲硫氨酸以及更多的N末端氨基酸残基都要被除去。真核生物的多肽的N末端残基还要进一步的乙醇化。羧基端的再修饰也时有发生。 （2）切除信号序列。 （3）非末端氨基酸的修饰 丝氨酸、苏氨酸残基的磷酸化；赖氨酸、谷氨酸残基的甲基化；谷氨酸、天冬氨酸的羧基化。 （4）糖基化工厂 糖蛋白的末冬酰氨，丝氨酸、苏氨酸和糖基结合。 （5）附加异戊二烯基团。许多真核生物蛋白质的半胱氨酸残基和异戊二烯基团以硫醚键结合。 （6）添加辅基 这些辅基和解键共价结合，如血红素，叶绿素、生物素等。 （7）前体修饰。有些蛋白生物合成时是以前体蛋白或多蛋白形式出现的要通过蛋白酶的切割，成为较小的活性分子。 （8）形成二硫键 3、同一种底物的同一种反应，有两种酶存在，但两种酶的活性调节能力不同：已糖激酶对6-碳糖不加选择，肌肉中的已糖激酶为别构酶，特别受其产物6-磷酸葡萄糖的强烈负反馈抵制；葡萄糖激酶则对D-葡萄糖有专一性，为诱导酶，活性不被6-磷酸葡萄糖抑制，在进食后血糖升高时，可以促使葡萄糖转变成糖原储存起来。 4、酶活力也叫酶活性，可以用酶活力单位表示，酶活力是由酶自身催化一定反应的的能力决定的，比活力是指单位质量的酶制剂的酶活力单位数，酶的比活力反应酶的纯度。 5、生化下P67 6、生化下P129 7、真核生物mRNA的5'端有一个帽子结构。这一结构的最大特点是7-甲基鸟嘌呤核苷和mRNA的5'端通过5'-5'三磷酸酯键相连，另外靠近这一帽子结构的第一和第二核苷酸的2„羟基甲基化；真核mRNA的3„末端有一个多聚A尾，这些结构都是转录后加上去的。 8、生化下P393 P397 9、有4个关键的位点 （1）反密码子 （2）携带氨基酸的3‟末端的氨基酸臂 （3）和核糖体上的蛋白质相互作用的二氢鸟嘧啶环和TΨC环 （4）氨酰t-RNA合成酶的结合位点 10、生化下P571
复习资料很多，下面的只是一部分第一章 绪论细胞生物学从显微水平、超微水平和分子水平等不同层次研究细胞结构、功能及生活史。细胞生物学由细胞学Cytology发展而来，Cytology是指对细胞形态（特别是染色体形态）的观察。在我国的基础学科发展规划中，细胞生物学与分子生物学，神经生物学和生态学并列为生命科学的四大基础学科。第一章 绪论本章内容提要:第一节 细胞生物学研究的内容与现状一、 细胞生物学是现代生命科学的重要基础学科二、细胞生物学的主要研究内容三、当前细胞生物学研究的总趋势与重点领域第二节 细胞学与细胞生物学发展简史附录 细胞生物学参考书:第一节 细胞生物学研究的内容与现状一、 细胞生物学是现代生命科学的重要基础学科生命体是多层次、非线性、多侧面的复杂结构体系，而细胞是生命体的结构与生命活动的基本单位，有了细胞才有完整的生命活动。细胞生物学 是研究细胞基本生命活动规律的科学，它是在不同层次（显微、亚显微与分子水平）上以研究细胞结构与功能、细胞增殖、分化、衰老与凋亡、细 胞信号传递、真核细胞基因表达与调控、细胞起源与进化等为主要内容。核心问题是将遗传与发育在细胞水平上结合起来。二、细胞生物学的主要研究内容1、细胞核、染色体以及基因表达的研究2、生物膜与细胞器的研究3、细胞骨架体系的研究4、细胞增殖及其调控5、细胞分化及其调控6、细胞的衰老与凋亡7、细胞的起源与进化8、细胞工程三、当前细胞生物学研究的总趋势与重点领域1、细胞生物学研究的总趋势细胞生物学与分子生物学(包括分子遗传学与生物化学) 相互渗透与交融是总的发展趋势；当前细胞生物学研究中的三大基本问题:（1）、细胞内基因组是如何在时间和空间上有序表达的？（2）、基因表达产物----主要是结构蛋白、核酸、脂质、多糖及其复合物，他们如何逐级装备成能行使生命活动的基本结构体系及各种细胞器？（3）、基因表达产物----主要是大量活性因子与信号分子，他们是如何调节细胞最重要的生命活动过程的？2 、当前细胞基本生命活动研究中的重要领域:（1）、染色体DNA与蛋白质相互作用关系-----主要是非组蛋白对基因组的作用；（2）、细胞增值、分化、凋亡的相互关系及其调控；（3）、细胞信号转导的研究；（4）、细胞结构体系的装配。3、细胞重大生命活动的相互关系第二节 细胞学与细胞生物学发展简史一、生物科学发展的三个阶段:1.形态描述生物学时期，19世纪以前；2.实验生物学时期，20世纪前半世纪；3.分子生物学时期，20世纪50-60年代至今。二、细胞生物学发展简史1. 细胞的发现2. 细胞学说的建立其意义细胞学说内容:1） 认为细胞是有机体，一切动植物都是由细胞发育而来,并由细胞和细胞产物所构成；2） 每个细胞作为一个相对独立的单位，既有它“自己的”生命,又对与其它细胞共同组成的整体的生命有所助益；3） 新的细胞可以通过老的细胞繁殖产生。3. 细胞学的经典时期1）原生质理论的提出2）细胞分裂的研究3）重要细胞器的发现4. 实验细胞学与细胞学的分支及其发展1）细胞遗传学的发展2）细胞生理学的研究3）细胞化学5. 细胞生物学学科的形成与发展三、细胞学说Jean-Baptiste de Lamark （1744~1829)，获得性遗传理论的创始人，法国退伍陆军中尉，50岁成为巴黎动物学教授，1809年他认为只有具有细胞的机体，才有生命。Charles Brisseau Milbel（1776~1854)，法国植物学家，1802年认为植物的每一部分都有细胞存在， Henri Dutrochet （1776~1847），法国生理学家，1824年进一步描述了细胞的原理，Matthias Jacob Schleiden（1804~1881)，德国植物学教授，1838年发表“植物发生论”(Beitr?ge zur Phytogenesis)，认为无论怎样复杂的植物都有形形色色的细胞构成。Theodor Schwann（1810~1882)，德国解剖学教授，一开始就研究Schleiden的细胞形成学说，并于1838年提出了“细胞学说”（Cell Theory)这个术语；1939年发表了“关于动植物结构和生长一致性的显微研究”Schwann提出:有机体是由细胞构成的；细胞是构成有机体的基本单位。1855 德国人R. Virchow 提出“一切细胞来源于细胞”（omnis cellula e cellula）的著名论断；进一步完善了细胞学说。把细胞作为生命的一般单位，以及作为动植物界生命现象的共同基础的这种概念立即受到了普遍的接受。恩格斯将细胞学说誉为19世纪的三大发现之一第二章 细胞基本知识概要本章内容提要:第一节 细胞的基本概念第二节 非细胞形态的生命体-------病毒及其与细胞的关系第三节 原核细胞与古核细胞第四节 真核细胞基本知识概要第一节 细胞的基本概念一、细胞是生命活动的基本单位1、一切有机体都由细胞构成，细胞是构成有机体的基本单位；2、细胞具有独立的、有序的自控代谢体系，细胞是代谢与功能的基本单位3、细胞是有机体生长与发育的基础4、细胞是遗传的基本单位，细胞具有遗传的全能性5、没有细胞就没有完整的生命二、细胞的基本共性1.所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质构成的生物膜，即细胞膜。2.所有的细胞都含有两种核酸:即DNA与RNA作为遗传信息复制与转录的载体。3.作为蛋白质合成的机器—核糖体，毫无例外地存在于一切细胞内。4.所有细胞的增殖都以一分为二的方式进行分裂。第二节 非细胞形态的生命体 —病毒及其与细胞的关系一、病毒与细胞在起源与进化中的关系病毒是非细胞形态的生命体，它的主要生命活动必须要在细胞内实现。病毒与细胞在起源上的关系，目前存在3种主要观点:1.生物大分子→病毒→细胞 病毒2.生物大分子 细胞3.生物大分子→细胞→病毒现在来说，第二种观点和第三种观点比较容易接受，而且第三种观点越来越有说服力。认为病毒是细胞演化的产物的观点主要依据如下:彻底的寄生性；病毒核酸与哺乳动物细胞DNA某些片断的相似性；病毒可以看成是核酸与蛋白质形成的复合大分子。第三节 原核细胞与古核细胞一、Basic characteristics of Prokaryotic cell1. 遗传的信息量小，遗传信息载体仅由一个环状DNA或RNA构成；2. 细胞内没有分化为以膜为基础的具有专门结构与功能的细胞器和细胞核膜。二、原核细胞的主要代表1、支原体为什么说支原体是一个细胞（1）能在培养基上生长，具有典型的细胞膜；（2）具有环状的双螺旋DNA作为遗传信息量的载体；（3）mRNA与核糖体结合形成多聚核糖体，指导蛋白质的合成；（4）以一分为二的方式分裂繁殖。支原体是最小、最简单的细胞。2、细菌1）、细菌的三种形态:球状、杆状和螺旋状2)、细菌细胞的核区与基因组:细菌的核区实际主要由一个环状的DNA分子组成；现在也可以把细菌的环状DNA理解为细菌基因组。3）、细菌细胞的表面结构:A. 细胞膜:主要功能是选择性的交换物质----吸收营养物质，排出代谢废物，并且有分泌与运输蛋白的作用。B. 细胞壁: 所有细菌的细胞壁的共同成分是肽聚糖，由乙酰氨基葡萄糖、乙酰胞壁酸与四五个氨基酸短肽聚合而成的多层网状大分子结构。C. 细胞壁特化结构:a. 中膜体-----细胞膜内陷而形成的；b. 荚膜-----是一层松散的粘液物质，有一定程度的保护作用；c. 鞭毛-----细菌的运动器官，与真核生物的鞭毛不同，它是由一种称为鞭毛蛋白的弹性蛋白所构成。4）、细菌细胞的核糖体——部分附着在细胞膜内侧，大部分游离于细胞质中，与蛋白质的合成密切相关。5）、细菌细胞核外DNA------质粒，是裸露环状DNA，在遗传工程研究中很重要。6）、细菌细胞的内生孢子，即芽孢，是细菌对不良环境或营养耗尽时的反应。3. 蓝藻细胞:是最简单的自养植物类型之一。基本特征:1）中心质------相当于细菌的核区，是遗传物质DNA所在部位。2）光合片层-----位于细胞质部分，是同心环状的膜片层结构，上边附着有藻胆蛋白体（包括藻蓝蛋白，一藻蓝蛋白和藻红蛋白），能够把光能传递给叶绿素a，进行原始光和作用。3）细胞质内含物4）细胞表面结构5）细胞分裂四、原核细胞与真核细胞的比较1、原核细胞与真核细胞最根本的区别 :（1）、细胞膜系统的分化和演变。 细胞内部结构和职能的分工是真核细胞区别于原核细胞的重要标志。（2）、遗传信息量与遗传装置的扩增与复杂化。 遗传信息重复序列与染色体多倍性的出现是真核细胞区别于原核细胞的另一重要标志。（3）、真核细胞内，遗传信息的转录与翻译有严格的阶段性和区域性，而在原核细胞内则是转录与翻译可以同时发生五、原核细胞与真核细胞基本特征的比较（p36)六、原核细胞与真核细胞的遗传结构装置和基因表达的比较(p37)七、古细菌古细菌（archaebacteria）与真核细胞曾在进化上有过共同历程主要证据（1）细胞壁的成分与真核细胞一样，而非由含壁酸的肽聚糖构成，因此抑制壁酸合成的链霉素， 抑制肽聚糖前体合成的环丝氨酸，抑制肽聚糖合成的青霉素与万古霉素等对真细菌类有强的抑制生长作用，而对古细菌与真核细胞却无作用。（2）DNA与基因结构:古细菌DNA中有重复序列的存在。此外，多数古核细胞的基因组中存在内含子。（3）有类核小体结构:古细菌具有组蛋白，而且能与DNA构建成类似核小体结构。（4）有类似真核细胞的核糖体:多数古细菌类的核糖体较真细菌有增大趋势，含有60种以上蛋白，介于真核细胞（70～84）与真细菌（55）之间。抗生素同样不能抑制古核细胞类的核糖体的蛋白质合成。（5）5S rRNA:根据对5S rRNA的分子进化分析，认为古细菌与真核生物同属一类，而真细菌却与之差距甚远。5S rRNA二级结构的研究也说明很多古细菌与真核生物相似。第四节 真核细胞基本知识概要一、真核细胞的基本结构体系1.生物膜系统:以脂质及蛋白质成分为基础的生物膜结构系统；2.遗传信息表达结构系统:以核酸（DNA或RNA）与蛋白质为主要成分的遗传信息表达系统3.细胞骨架系统:由特异蛋白分子装配构成的细胞骨架系统。二、细胞的大小及其分析各类细胞直径的比较三、植物细胞与动物细胞的比较植物细胞特有的结构: 1. 细胞壁 2. 液泡 3. 叶绿体第三章 细胞生物学研究方法本章内容提要：第一节 细胞形态结构的观察方法第二节 细胞组分的分析方法第三节 细胞培养、细胞工程与显微操作技术第一节 细胞形态结构的观察方法一、光学显微镜技术（一）普通光学显微镜? 1. 构成：? ①照明系统? ②光学放大系统? ③机械装置? 2. 原理：经物镜形成倒立实像，经目镜进一步放大成像。? 3. 分辨率：指分辨物体最小间隔的能力。（二）荧光显微镜 Fluorescence microscope特点：光源为紫外线，波长较短，分辨力高于普通显微镜；有两个特殊的滤光片；照明方式通常为落射式。用于观察能激发出荧光的结构。用途：免疫荧光观察、基因定位、疾病诊断。（三）激光共聚焦扫描显微境Laser confocal scanning microscope, LCSM用激光作光源，逐点、逐行、逐面快速扫描。能显示细胞样品的立体结构。分辨力是普通光学显微镜的3倍。用途类似荧光显微镜，但能扫描不同层次，形成立体图像。（四）相差显微镜? 把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处。? 环形光阑（annular diaphragm）：位于光源与聚光器之间。? 相位板（annular phaseplate）：物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ。原理用途：观察未经染色的玻片标本（五）微分干涉差显微镜 Differential interference contrast microscope （DIC）? 1952年，Nomarski发明，利用两组平面偏振光的干涉，加强影像的明暗效果，能显示结构的三维立体投影。标本可略厚一点，折射率差别更大，故影像的立体感更强。二、电子显微镜1、电子显微镜的基本知识电镜与光镜的比较显微镜 分辨本领 光源 透镜 真空 成像原理LM 200nm 可见光（400-700） 玻璃透镜 不要求真空 利用样品对光的吸收形成明暗反差和颜色变化100nm 紫外光（约200nm) 玻璃透镜 不要求真空TEM 0.1nm 电子束（0.01-0.9） 电磁透镜 要求真空 利用样品对电子的散射和透射形成明暗反差2、 原理? 以电子束作光源，电磁场作透镜。电子束的波长短，并且波长与加速电压(通常50~120KV)的平方根成反比。? 由电子照明系统、电磁透镜成像系统、真空系统、记录系统、电源系统等5部分构成。? 分辨力0.2nm，放大倍数可达百万倍。? 用于观察超微结构（ultrastructure），即小于0.2μm、光学显微镜下无法看清的结构，又称亚显微结构（submicroscopic structures）。3、主要电镜制样技术? 1）超薄切片? 电子束穿透力很弱，用于电镜观察的标本须制成厚度仅50nm的超薄切片，用超薄切片机（ultramicrotome）制作。? 通常以锇酸和戊二醛固定样品，丙酮逐级脱水，环氧树脂包埋，以热膨胀或螺旋推进的方式切片，重金属（铀、铅）盐染色。? 2）负染技术用重金属盐(如磷钨酸)对铺展在载网上的样品染色；吸去染料，干燥后，样品凹陷处铺了一层重金属盐，而凸的出地方没有染料沉积，从而出现负染效果，分辨力可达1.5nm左右。3）冰冻蚀刻 freeze-etching? 亦称冰冻断裂。标本置于干冰或液氮中冰冻。然后断开，升温后，冰升华，暴露出了断面结构。向断裂面上喷涂一层蒸汽碳和铂。然后将组织溶掉，把碳和铂的膜剥下来，此膜即为复膜（replica）。三、扫描隧道显微镜scanning tunneling microscope，STM? 原理：根据隧道效应而设计，当原子尺度的针尖在不到一个纳米的高度上扫描样品时，此处电子云重叠，外加一电压（2mV~2V），针尖与样品之间形成隧道电流。电流强度与针尖和样品间的距离有函数关系，将扫描过程中电流的变化转换为图像，即可显示出原子水平的凹凸形态。? 分辨率：横向为0.1~0.2nm，纵向可达0.001nm。? 用途：三态（固态、液态和气态）物质均可进行观察。第二节 细胞组分的分析方法一、离心分离技术用途：于分离细胞器与生物大分子及其复合物转速为10~25kr/min的离心机称为高速离心机。转速>25kr/min，离心力>89Kg者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100000r/min，离心力超过500Kg。（一）差速离心 Differential centrifugation? 特点：– 介质密度均一；– 速度由低向高，逐级离心。? 用途：分离大小相差悬殊的细胞和细胞器。? 沉降顺序：核——线粒体——溶酶体与过氧化物酶体——内质网与高基体——核蛋白体。? 可将细胞器初步分离，常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。（二）密度梯度离心? 用介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过离心力场的作用使细胞分层、分离。? 类型：速度沉降（velocity sedimentation）、等密度沉降（isopycnic sedimentation）。? 常用介质：氯化铯、蔗糖、多聚蔗糖。? 分离活细胞的介质要求：– 1）能产生密度梯度，且密度高时，粘度不高；– 2）PH中性或易调为中性；– 3）浓度大时渗透压不大；– 4）对细胞无毒。二、 细胞内核酸、蛋白质、酶、糖与脂类等的显示方法?原理：利用一些显色剂与所检测物质中一些 特殊基团特异性结合的特征，通过显 色剂在细胞中的定位及颜色的深浅来判断某种物质在细胞中的分布和含量。Feulgen Staining三、特异蛋白抗原的定位与定性1、免疫荧光技术： 快速、灵敏、有特异性，但其分辨率有限2、蛋白电泳(SDS-PAGE)与免疫印迹反应(Western-Blot)3、免疫电镜技术：?免疫铁蛋白技术?免疫酶标技术应用：通过对分泌蛋白的定位，可以确定某种蛋白的分泌动态；胞内酶的研究；膜蛋白的定位与骨架蛋白的定位等四、细胞内特异核酸的定位与定性?光镜水平的原位杂交技术（同位素标记或荧光素标记的探针）?电镜水平的原位杂交技术（生物素标记的探针与抗生物素抗体相连的胶体金标记结合）?PCR技术五、放射自显影技术1、原理及应用：?利用同位素的放射自显影，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究；?实现对细胞内生物大分子进行动态和追踪研究。2、步骤：?前体物掺入细胞（标记：持续标记和脉冲标记）———放射自显影六、定量细胞化学分析技术1、显微分光光度术（Microspectrophotometry）?利用细胞内某些物质对特异光谱的吸收，测定这些物质（如核酸与蛋白质等）在细胞内的含量。包括： 紫外光显微分光光度测定法可见光显微分光光度测定法? 流式细胞仪（Flow Cytometry）?主要应用：用于定量测定细胞中的DNA、RNA或某一特异蛋白的含量；测定细胞群体中不同时相细胞的数量；从细胞群体中分离某些特异染色的细胞；分离DNA含量不同的中期染色体。第三节 细胞培养、细胞工程与显微操作技术一、细胞的培养1、动物细胞培养（1） 类型：A 原代培养细胞（primary culture cell)---从机体取出后立即 培养的细胞。1-10代以内的细胞培养称为原代培养细胞。B 继代培养细胞（sub-culture cell）---适宜在体外培养条件下持续传代培养的细胞称为传代培养细胞(2) 细胞株（cell strain） 正常二倍体，接触抑制.10~50代(3) 细胞系（cell line） 亚二倍体或非整倍体，接触抑制丧失，容易传代培养。50代以后。2、植物细胞（1）、 原生质体培养 （体细胞培养）（2）、单倍体细胞培养（花药培养）3、非细胞体系（cell-free system）：只来源于细胞，而不具有完整的细胞结构，但包含了进行正常生物学反应所需的物质组成体系。二、细胞工程1、细胞工程：在细胞水平上有计划的保存、改变和创造细胞遗传物质，以产生新的物种和品系，或大规模培养组织细胞以获得生物产品。其所使用的技术主要是：细胞培养、细胞分化的定向诱导、细胞融合与显微注射。2、细胞融合（cell fusion）与细胞杂交（cell hybridization）技术? 用人工方法把同种或不同种的两个或两个以上的细胞，通过介导物作用，融合成一个细胞的技术。亦称细胞杂交（cell hybridization）? 同核融合细胞? 异核融合细胞3、单克隆抗体（monoclone antibody）技术单克隆抗体技术? 正常淋巴细胞（如小鼠脾细胞）具有分泌抗体的能力，但不能长期培养，瘤细胞（如骨髓瘤）可以在体外长期培养，但不分泌抗体。于是英国人Kohler和Milstein 1975将两种细胞杂交而创立了单克隆抗体技术，获1984年诺贝尔奖。第四章 细胞质膜与细胞表面第一节 细胞质膜与细胞表面特化结构第二节 细胞连接第三节 细胞外被与细胞外基质第一节 细胞质膜与细胞表面特化结构? 细胞膜(cell membrane)又称质膜（plasma membrane），是指围绕在细胞最外层，由脂质和蛋白质组成的生物膜。细胞膜只是真核细胞生物膜的一部分，真核细胞的生物膜（biomembrane）包括细胞的内膜系统（细胞器膜和核膜）和细胞膜（cell membrane）。一、细胞膜的结构模型1、结构模型1） 三明治质膜结构模型: E.Gorter和F．Grendel（1925）, 提出 “protein-lipid-protein”三夹板或三明治质膜结构模型，这一模型影响20年之久。2） 单位膜模型(unit membrane model)：J.D.Robertson（1959年），提出单位膜模型，大胆的推断所有的生物膜都是由蛋白质-脂类-蛋白质单位膜构成，在电镜下观察，细胞膜显示出 暗---亮----暗三条带，两侧的暗带的厚度约2nm, 推测是蛋白质，中间的亮带厚度约3.5nm，推测是脂双层分子。整个膜的厚度约是7.5nm。3） 流动镶嵌模型(fluid mosaic model)： S.J.Singer和G.Nicolson（1972），提出生物膜的流动镶嵌模型(fluid mosaic model)，这种模型认为细胞膜是由脂质双分子层组成，蛋白质以不同的方式，镶嵌，覆盖或横跨双分子层。流动镶嵌模型强调了，a 膜的流动性，b 膜蛋白分布的不对称性。4） 脂筏模型（lipid rafts model）： K.Simons et al(1997)，提出了脂筏模型（lipid rafts model）Functional rafts in Cell membranes. Nature 387:569-572。2、生物膜结构目前对生物膜结构的认识可以归纳如下:1）磷脂双分子层是组成生物膜的基本结构成分,尚未发现膜结构中起组织作用的蛋白；2）蛋白分子以不同方式镶嵌在脂双层分子中或结合在其表面, 膜蛋白是赋予生物膜功能的主要决定者；3）生物膜可以看成是蛋白质在双层脂分子的二维溶液。二、生物膜的组成成分（一）、膜脂成分：膜脂主要包括磷脂、糖脂和胆固醇三种类型。? 1、磷脂：1）膜脂的基本成分（50％以上）? 2）分为二类: a 甘油磷脂（磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇）? b 鞘磷脂? 3) 主要特征：①具有一个极性头和两个非极性的尾(脂肪酸链) （心磷脂除外）；? ②脂肪酸碳链为偶数,多数碳链由16,18或20个组成；? ③既具有饱和脂肪酸(如软脂酸)又有不饱和脂肪酸(如油酸)；? 2、糖脂：糖脂普遍存在于原核和真核细胞的质膜上（5％以下）,神经细胞糖脂含量较高；? 3、胆固醇： 1）胆固醇存在于真核细胞膜上（30%以下），细菌质膜不含有胆固醇，但某些细菌的膜脂中含有甘油脂等中性脂类。? 2）胆固醇的作用：? ① 调节膜的流动性；? ② 增加膜的稳定性；? ③ 降低水溶性物质的通透性。（二）、膜脂的运动方式? 1、侧向运动： 沿膜平面的侧向运动（基本运动方式）? 2、自旋运动： 脂分子围绕轴心的自旋运动；? 3、 摆 动： 脂分子尾部的摆动；? 4、 翻转运动：双层脂分子之间的翻转运动，发生频率还不到脂分子侧向交换频率的? 10－10。但在内质网膜上,新合成的磷脂分子翻转运动发生频率很高。�? 1、定义：脂质体是根据磷脂分子可在水相中形成稳定的脂双层膜的趋势而制备的人工膜。三、膜蛋白（二）、膜内在蛋白与膜脂结合的方式1、膜蛋白的跨膜结构域与脂双层分子的疏水核心的相互作用。2、跨膜结构域两端携带正电荷的氨基酸残基与磷脂分子带负电的极性头形成离子键，或带负电的氨基酸残基通过Ca2+、Mg2+等阳离子与带负电的磷脂极性头相互作用。3、某些膜蛋白在细胞质基质一侧的半胱氨酸残基上共价结合脂肪酸分子,插入脂双层之间,进一步加强膜蛋白与脂双层的结合力,还有少数蛋白与糖脂共价结合。（三）、去垢剂1、定义：去垢剂是一端亲水、另一端疏水的两性小分子,是分离与研究膜蛋白的常用试剂。四、膜的流动性(sk)（一）、膜脂的流动性膜脂的流动性主要由1 脂分子本身的性质决定的,脂肪酸链越短, 不饱和程度越高,膜脂的流动性越大。2 温度对膜脂的运动有明显的影响。3 在细菌和动物细胞中常通过增加不饱和脂肪酸的含量来调节膜脂的相变温度以维持膜脂的流动性。4 在动物细胞中，胆固醇对膜的流动性起重要的双向调节作用。（二）、 膜蛋白的流动�荧光抗体免疫标记实验�成斑现象(patching)或成帽现象(capping) �（三）、膜的流动性受多种因素影响；细胞骨架不但影响膜蛋白的运动，也影响其周围的膜脂的流动。膜蛋白与膜脂分子的相互作用也是影响膜流动性的重要因素荧光抗体免疫标记实验（二）、膜脂与糖脂的不对称性�? 膜脂的不对称性：指同一种膜脂分子在膜的脂双层中呈不均匀分布；? 糖脂的不对称性：糖脂分子仅存在于质膜的ES面，是完成其生理功能的结构基础
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一、硕士点概况首先咱们来看一下科大的生物学咋样，科大一直以来都以基础学科为发展重心，科大的生命科学学院的前身为中国科学技术大学生物物理系，由著名科学家贝时璋先生于1958年创建。具体发展历史大家自己去官网看吧，目前科大有八个研究部:生物化学与分子生物学研究部、神经生物学与生物物理学研究部、系统生物学研究部、医药生物技术研究部、微生物学与免疫学研究部、细胞生物学与发育生物学研究部、生物医学工程研究部、植物与生态学工程研究部；另外，学院设有五个科研技术平台：生命科学公共实验中心、生物安全三级实验室、实验动物中心、GMP中试基地、集成影像中心；还有各种研究基地合平台，总之实验室资源很丰富。中科大生物学招生单位有生命科学学院、附属第一医院、苏州生物医学工程技术研究所、研究生院科学岛分院，生物与医药招生单位有生命科学学院、附属第一医院、苏州生物医学工程技术研究所、研究生院科学岛分院、纳米技术与纳米仿生学院（苏州纳米所），主要由生命科学学院招生。在第四轮学科评估中，中科大生物学评估为A，确实也是非常厉害，那考研难度到底咋样呢，我觉得相对于其他热门专业，难度肯定是低一些的，但是不是随便就是能考上的，如果不下足功夫感觉也难以考上，总体来说我觉得难度不是很大，具体我们下面以数据说话，来来上干货。二、信息公开度报录比：无考试大纲：有参考书目：有是否收调剂：上线人数不足时候会收是否保护第一志愿：保护第一志愿是否开设夏令营：开设是否一级学科统一招生：是是否一级学科统一命题：是是否一级学科统一划线：是三、中科大生物学考试科目科大上文也说了，有很多院所都招收研究生，不过总体来说生命科学学院招收的人数占绝大多数，以下以生命科学与医学部（生命科学学院和第一附属医院）为例说明考试科目以上生物学是学硕，生物与医药是专硕四、招生人数和复试线如下中科大2020和2021统考招生人数中科大2020和2021统考招生人数五、参考书目可考试大纲关于考试大纲和考试科目见官网中国科学技术大学研究生招生在线-招生简章yz.ustc.edu.cn/sszs_2021/cksm3.html六、2022复试分析线下复试情况：复试形式：机考+面试。复试内容：复试（机考）为专业知识综合考试，涵盖所有本科基础生物学实验教学内容。其中1/3为英文试题。复试成绩：满分100分。机考满分150分，面试满分100分，复试成绩位于参加复试考生的最后5%，复试成绩为不合格，不予录取。复试成绩=（机考成绩+面试成绩）÷2.5。最终成绩：满分100分。初试成绩不计政治，复试成绩占比5/13。即：最终成绩=（初试成绩【不计政治】÷4×8+复试成绩×5）÷13。录取 按最终成绩由高到低排序，提出拟录取名单报批。为保证招生质量，报批人数可小于招生计划。线上复试情况：生物学相关学科网络综合面试内容包括专业知识综合考核和综合素质考查。专业知识综合考核（替代招生简章中的专业知识综合考试部分）包括本科生物学专业与实验知识考核和英语能力测试，综合素质考查主要考察考生思想政治素质和品德、逻辑思维和语言表达、科研能力、创新潜质等方面。生物学相关学科网络综合面试成绩满分为250分，其中专业知识综合考核150分，综合素质考查100分。生物学相关学科复试成绩合格的考生，按照部分初试科目成绩和复试成绩之和进行总成绩排序，作为拟录取依据。拟录取依据的总分满分为650分，其中初试成绩满分400分（包括初试英语、专业课一、专业课二成绩），占62％；复试成绩满分250分，占38％。下面是去年初试成绩分布情况。七、22级上岸高分经验为了给23学弟学妹带来最具有时效的专业课复习攻略，学长特邀请22级几个高分上岸的同学分享他们的上岸经验，希望能帮到大家【中科大生物学404分考研上岸经验贴——专业课考618生理学】第一、关于择校和定专业学校选择我当初选择这个学校，有以下几个原因：1. 20年学校直系学长学姐上岸科大人数较多；2. 在合肥（我家就在合肥）；3. 校内调剂较多；4. 不歧视本科学历（我自己就是双非普通一本）；5. 初试不压分；6. 难度中等，没有偏题怪题；7. 科大生物专业排名挺好专业课选择我选择的是 841 细胞生物学和 618 生理学，学弟学妹主要会在生化和生理之间纠结。1. 生理or生化 哪个看起书来比较不头疼？（如果之前没有学过生理，可以网上搜索生理的课听一两节感受一下）2. 你更擅长偏背诵型的题or计算型的题？（生化有计算，具体可以网上搜搜这两套题型的科大真题看看）3. 细胞生物学是需要大量背诵的，你如果选择生理，能不能做好疯狂背两本书的准备？4. 我个人认为选择生理和生化不影响复试老师对你的看法以及选择导师的差异（但网上有人说复试老师比较喜欢选生化的初试学生，这个自己斟酌）。若说影响，可能就是无论你初试选择是生理or生化，复试都会包含这两门的题。5. 生理有英译汉，生化我不太清楚，可以结合 2 一起综合一下。6. 选生理可能后期不好调剂，生化考的人则较多。无论选择什么，一旦选择后就不要改了，后期会很麻烦也很影响心态。7. （个人感觉）生理比生化总体得分高一些，具体你们可以比对每年上岸的成绩。差不多我暂时就想到这些选择纠结的想法，稍后如有其他问题，欢迎学弟学妹私聊我。我也会及时更新。第二、初试经验我购买/使用的相关书籍1. 政治肖秀荣——《精讲精练》；《1000题》；《肖四》；《肖八》；《形势政策》；《考点预测》；《考前直播课讲义》；《知识点提要（未用）》；腿姐——《腿四》；《腿姐冲刺班讲义》；《腿姐点睛押题讲义》；徐涛——《冲刺背诵笔记》；《考前预测必备20题》（几乎未用）；《形势与政策》（未用） 《徐涛八套卷》（几乎未写）；《风中劲草》（未使用）；2. 英语真题——《01—20黄皮书》词汇——黄皮书自带词汇书；《词汇的逻辑》 唐迟（未看）作文——《写作不过如此》 刘晓燕；《何凯文写作冲刺20篇》（几乎未用）；《王江涛预测作文20篇》（几乎未用）考研阅读相关热点文章期刊（看的少）3. 841细胞生物学《细胞生物学》—翟中和 （第五版）《细胞生物学学习指南》（高等教育出版社）（和书本配套的，编书的大佬出的配套资料）蓝皮书系列：841细胞生物学历年真题及答案解析841细胞生物学考点解析与高分笔记841细胞生物学重点总结及背诵手册4. 618生理学《生理学》—朱大年 第九版（人民卫生出版社）《生理学学习指导与习题集》 第三版 （人民卫生出版社）绿皮书系列：618生理学历年真题及答案解析618生理学考点解析618生理学重点总结及背诵手册PS：我没看的不代表不好，因为我时间有限，没来的及看，所以不能做评判。第三、初试各科复习策略1. 政治：76分我是九月份开始的，跟徐涛课看肖秀荣精讲精练过了一遍。然后就到十月份了。接着开始刷1000题，正好也可以回忆一下前面看的课。差不多到十一月上中旬肖秀荣知识点提要和徐涛冲刺笔记出了，我两个都买了，选择了一下，看的徐涛冲刺笔记（自己觉得更加轻松一些，看肖老的感觉好严肃）十一月中旬差不多，肖秀荣考点预测出来了，里面全都是大题，直接拿来背的那种（基本上是后期肖四肖八大题的来源），我一开始背了一点，但是鉴于对真题没什么概念，所以效率不高，就放弃了。与此同时，是肖老的形势政策，是一年中从一月大约至十一月中旬的时事热点，就每天读一点。12月上旬，肖八差不多出来了。此时我1000题还未刷完...然后就做肖八了。我只做了选择题，大题没看。接着是徐涛的八套卷和腿四出了。做完了腿四的选择以及徐涛的前两套好像（我觉得我错的有点离谱和做肖八腿四比起来）。这个时候我看了腿姐的冲刺班视频，配她的讲义（强烈推荐 大题 选择 时事 技巧 套路 ）然后我对大题有了一定的概念，回过头来扫了一遍肖八腿四的大题，做到心中有数。十二月中旬接着肖四，徐涛20题，徐涛形势政策出来了，肖四肯定是要写的，依然是只写选择。徐涛20题和肖老考点预测类似，我没怎么看，他的形势政策也没怎么看。这段时间要开始背大题了，我前期除了背过一点肖老的考点预测，就没有背过大题。但是看了腿姐的冲刺课，自己整理了一下大题，并针对性的选择肖老徐涛腿姐给出的大题模板自己整理了一份，然后就开始背这个。当然，肖四的大题要好好看一下（我没有说背，因为我整理的里面就可以涵盖这些），选择题开始二刷一遍，主要是一些固定搭配（腿姐说的keyword），形势政策类的选择题以及自己总是会错的基础类选择题（适时可以翻一下冲刺笔记，看看自己哪里忘了）。考前十天左右，腿姐的押题视频和讲义（主要是把之前冲刺讲义再进行压缩，每一大题都押两题，减少背诵量以及一些新的时政补充）前面背过一遍大题，这里只是巩固加深。同时，肖老的考前直播课讲义，看了一下肖老补充的大题，以及选择题的预测。最后，在考前再背一遍大题，以及选择题关键词记忆。PS：如果政治不求高分，完全可以只背肖四，照样估计60＋。看个人选择。所以大家自己衡量一下性价比，选择适合自己的学习政治的方式，毕竟还要以专业课为主。（科大综合排名不计初试政治，但政治分数线60，只背肖四不能100%保证60＋，虽然大概率可以）。2. 英语：65分两个part：基础部分（单词 语法 长难句）& 真题部分(阅读 作文 翻译 七选五 完型)基础part单词：①我用的不背单词这个app，选择的词库是真题5500，从四月开始刷，前期没事就看看，只规定每天要背多少个，前期是50一天，没有固定背的时间。到六七月份我会规定每天背100个，时间放在上午前一两个小时（因为这个app是要先回忆先前背过的单词）。大概十月十一月的时候我就上升到200一天左右。②当开始刷真题的时候，就把阅读里面每一篇自己不认识的单词记下来，这就形成了自己的真题单词库。③黄皮书自带的单词书，是按照考研高频程度来分的，后期我主要背这个。语法：我只看了唐迟的语法课，因为短小精悍，主打考研常见语法。同时也推田静的语法课，比较系统全面，适合基础不太好以及有充足时间的同学。长难句：同语法，我看的是唐迟的视频，依旧因为短小精悍。真题part阅读：先自己把全套做一遍，再跟着唐迟的视频过一遍。再自己做一遍。主要是要找到选项的逻辑，和文章的逻辑，这样拿分就稳准狠，具体方法去看唐迟。唐迟阅读没话说！作文：刘晓燕的作文课＋她的作文书，然后自己整理一套模板。翻译，七选五，完型：宋逸轩（属于唐迟考上的逻辑团队的）小三门在后期再看就行，占比相对较少。也有很多技巧跟着宋逸轩老师就好。考试时写的顺序：小作文-大作文-阅读-七选五-翻译-完型（这是我的顺序）3. 618生理学：138分专业课是最重要的。所以花在专业课上的时间占比一定是最多的。首先要申明一下，由于去年疫情原因，我开始考研复习时间较晚，真正开始专业课复习在七月中旬。但不要抱着七月份准备也来得急的这种想法，你们可以早开始就早开始。第一遍，书＋视频（杨鹏杰，科大mooc， 华中科技大学mooc，北京大学mooc，华中农业大学mooc）＋书配套的app（人卫图书增值）。主要是以自己能理解为主，所以会结合着很多视频一起学习，然后做笔记。如果实在不会也不要硬理解，有很多点你在二刷三刷的时候自然就懂了。第二遍，书，习题（生理学学习指导与习题集），补充笔记。第三遍，开始做真题，在书上相应位置做好标记，这样做完，你就大概清楚这个学校喜欢考哪些内容，怎么考等等。同时，整理出小题可能会考的点，包括填空，选择，判断。第四遍，背！我是背书，着重把考过的题重点背，但没考过的也要背，同时开始背英语专业词汇（书后面），我是自己筛了一下哪些可能考，哪些一定不考的词汇，然后每天和背英语单词一起，一天一页，读加背。这样到你考前应该能读背个三四遍。第五遍，我是在考生理前的晚上整体过了一遍。4. 841细胞生物学：125分第一遍，看书＋川大慕课（两类：上课录像和mooc）＋记笔记第二遍，书，蓝皮书笔记与背诵手册，补充笔记。第三遍，蓝皮书汇总了历年真题，第三遍就是做真题，细胞近几年题型都保持为 名词解释 简答 问答 这三种题型，所以也就是说都是背诵的知识点。我就按照章节把每年真题在这一章的考题用word汇总了一下，主要还是总结名词解释和大题。小题可以看一下，然后考虑它是否可以变成大题，如果可以就把相应的小题当作大题来整理背诵。第四遍，背书和真题。没什么好说的，就是反反复复的的背。第五遍，也是考前一天晚上在背生理前快速过了一半，剩下一半我放在了第二天中午背。因为是上午考生理，下午考细胞。综上，整体来看，我两门专业课复习方法差不多，都是过了五遍。大家可以根据自己看书的进度和考研剩余天数长短来选择过专业课的遍数。你身边可能有人过了十几遍，那是他看书比较快。如果你和我一样，看书比较慢，过个4，5遍是没问题的，主要还是得自己心里清楚自己到底复习的怎么样。不要人云亦云，亦或盲目焦虑。第四、复试经验考试形式科大近两年都是采取了线上复试。考试内容复试考核都是本科阶段所有所学基础知识，包括细胞，生化，分子，生理，植物，动物，微生物等等专业基础课程知识和相应实验以及专业英语读译能力。知道它考察的是什么了，相应的就可以分为三大类：①专业理论知识②专业实验知识③专业文献翻译复试流程①线上：自我介绍--抽题（可能会抽两套）（专业知识＋文献翻译）--综合问答②线下：机考（实验题，1/3为英文试题）＋面试（流程同线上，只是抽题只抽一套题）复试报录比: 1:1.2复试分数线对于22级学弟学妹来说，21考研复试分数线为340，其中政治英语单科线均为60。（20考研不能作为参考）复试准备准备复试的时间有三种：①心里特别确定一定能考上，那就可以初试结束就开始准备复试，这样你就有三个多月的准备时间，你可以充分准备以上三大类。②等到初试成绩出来，很高分，稳进复试，那么差不多有将近一个月的准备时间。③初试成绩出来，分数很危险，不知道自己能不能进复试，那就要等到官网出复试分数线，从复试线公布到复试差不多一周多的时间。关于我的复试准备我是属于第二种，所以我就以第二种的复习时长来说。时间短，任务重。①专业理论知识，我没什么时间看。我主要看了实验和翻译。②官网有指定的实验教材:包括细胞，生化分子，生理，除此之外，官网还要求了普通生物学实验书，微生物学实验书，遗传学实验书。我主要看了科大指定的生化分子，细胞，生理这三本实验书。微生物和遗传看了一点点。③文献翻译：两本书：a、生物专业英语-蒋悟生，这本书很基础，把里面单词背背，文章自己读和翻一遍。 b、基因X，不需要全看完，这本书1000多页，也看不完。看每一章的综述就差不多了。④自我介绍控制在2min内，所以一些什么社团学生会经历就没必要说了。老师着重看的是科研能力，专业基础知识能力，英语能力等。⑤综合问答，主要看你科研能力和抗压能力以及自己有没有对未来的自我规划和清楚认知等等。这个考前在B站上面多搜搜，自己总结总结，背诵即可。最后，复试最重要的是心态，不要紧张，不会的题不要逞强，坦诚说出来即可，具体的复试技巧复试前多看B站视频即可。写给学弟学妹的建议考研就是磨练你意志力的时候，一旦选择了就不要轻易放弃或犹豫不定。只要你能坚持到最后，你的成绩不会辜负你的。我到12月份的时候也有想放弃的时候，确实颓废了几天，也许放弃后的一瞬间是轻松的，但时间一长，这种压力和不安比你没放弃前更加难熬。所以我又重新拾起了书本，最终，成绩没有辜负我。所以，学弟学妹们，考研前期可以适当节奏慢一点没关系的，其实我们努力想得到一件什么东西时候，只要沉着镇静、实事求是，就可以轻易地、神不知鬼不觉地达到目的，而如果过于使劲，闹得太凶，就像一个小孩扯桌布，结果却是一无所获，只不过把桌上的好东西都扯到地上，永远也得不到了，所以大家要明白考研是场持久战，后期强度是很大的，战线太长，生理上和精神上都吃不消的，要学会适当调整自己，相信我，会赢的。所以，慢慢来，加油鸭，学姐在科大等你们~以上就是22级初试404的学姐的经验贴，无论是备考攻略还是攻略都是非常值得23级学弟学妹好好学习的，希望能帮到大家
复习资料很多，下面的只是一部分第一章 绪论细胞生物学从显微水平、超微水平和分子水平等不同层次研究细胞结构、功能及生活史。细胞生物学由细胞学Cytology发展而来，Cytology是指对细胞形态（特别是染色体形态）的观察。在我国的基础学科发展规划中，细胞生物学与分子生物学，神经生物学和生态学并列为生命科学的四大基础学科。第一章 绪论本章内容提要:第一节 细胞生物学研究的内容与现状一、 细胞生物学是现代生命科学的重要基础学科二、细胞生物学的主要研究内容三、当前细胞生物学研究的总趋势与重点领域第二节 细胞学与细胞生物学发展简史附录 细胞生物学参考书:第一节 细胞生物学研究的内容与现状一、 细胞生物学是现代生命科学的重要基础学科生命体是多层次、非线性、多侧面的复杂结构体系，而细胞是生命体的结构与生命活动的基本单位，有了细胞才有完整的生命活动。细胞生物学 是研究细胞基本生命活动规律的科学，它是在不同层次（显微、亚显微与分子水平）上以研究细胞结构与功能、细胞增殖、分化、衰老与凋亡、细 胞信号传递、真核细胞基因表达与调控、细胞起源与进化等为主要内容。核心问题是将遗传与发育在细胞水平上结合起来。二、细胞生物学的主要研究内容1、细胞核、染色体以及基因表达的研究2、生物膜与细胞器的研究3、细胞骨架体系的研究4、细胞增殖及其调控5、细胞分化及其调控6、细胞的衰老与凋亡7、细胞的起源与进化8、细胞工程三、当前细胞生物学研究的总趋势与重点领域1、细胞生物学研究的总趋势细胞生物学与分子生物学(包括分子遗传学与生物化学) 相互渗透与交融是总的发展趋势；当前细胞生物学研究中的三大基本问题:（1）、细胞内基因组是如何在时间和空间上有序表达的？（2）、基因表达产物----主要是结构蛋白、核酸、脂质、多糖及其复合物，他们如何逐级装备成能行使生命活动的基本结构体系及各种细胞器？（3）、基因表达产物----主要是大量活性因子与信号分子，他们是如何调节细胞最重要的生命活动过程的？2 、当前细胞基本生命活动研究中的重要领域:（1）、染色体DNA与蛋白质相互作用关系-----主要是非组蛋白对基因组的作用；（2）、细胞增值、分化、凋亡的相互关系及其调控；（3）、细胞信号转导的研究；（4）、细胞结构体系的装配。3、细胞重大生命活动的相互关系第二节 细胞学与细胞生物学发展简史一、生物科学发展的三个阶段:1.形态描述生物学时期，19世纪以前；2.实验生物学时期，20世纪前半世纪；3.分子生物学时期，20世纪50-60年代至今。二、细胞生物学发展简史1. 细胞的发现2. 细胞学说的建立其意义细胞学说内容:1） 认为细胞是有机体，一切动植物都是由细胞发育而来,并由细胞和细胞产物所构成；2） 每个细胞作为一个相对独立的单位，既有它“自己的”生命,又对与其它细胞共同组成的整体的生命有所助益；3） 新的细胞可以通过老的细胞繁殖产生。3. 细胞学的经典时期1）原生质理论的提出2）细胞分裂的研究3）重要细胞器的发现4. 实验细胞学与细胞学的分支及其发展1）细胞遗传学的发展2）细胞生理学的研究3）细胞化学5. 细胞生物学学科的形成与发展三、细胞学说Jean-Baptiste de Lamark （1744~1829)，获得性遗传理论的创始人，法国退伍陆军中尉，50岁成为巴黎动物学教授，1809年他认为只有具有细胞的机体，才有生命。Charles Brisseau Milbel（1776~1854)，法国植物学家，1802年认为植物的每一部分都有细胞存在， Henri Dutrochet （1776~1847），法国生理学家，1824年进一步描述了细胞的原理，Matthias Jacob Schleiden（1804~1881)，德国植物学教授，1838年发表“植物发生论”(Beitr?ge zur Phytogenesis)，认为无论怎样复杂的植物都有形形色色的细胞构成。Theodor Schwann（1810~1882)，德国解剖学教授，一开始就研究Schleiden的细胞形成学说，并于1838年提出了“细胞学说”（Cell Theory)这个术语；1939年发表了“关于动植物结构和生长一致性的显微研究”Schwann提出:有机体是由细胞构成的；细胞是构成有机体的基本单位。1855 德国人R. Virchow 提出“一切细胞来源于细胞”（omnis cellula e cellula）的著名论断；进一步完善了细胞学说。把细胞作为生命的一般单位，以及作为动植物界生命现象的共同基础的这种概念立即受到了普遍的接受。恩格斯将细胞学说誉为19世纪的三大发现之一第二章 细胞基本知识概要本章内容提要:第一节 细胞的基本概念第二节 非细胞形态的生命体-------病毒及其与细胞的关系第三节 原核细胞与古核细胞第四节 真核细胞基本知识概要第一节 细胞的基本概念一、细胞是生命活动的基本单位1、一切有机体都由细胞构成，细胞是构成有机体的基本单位；2、细胞具有独立的、有序的自控代谢体系，细胞是代谢与功能的基本单位3、细胞是有机体生长与发育的基础4、细胞是遗传的基本单位，细胞具有遗传的全能性5、没有细胞就没有完整的生命二、细胞的基本共性1.所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质构成的生物膜，即细胞膜。2.所有的细胞都含有两种核酸:即DNA与RNA作为遗传信息复制与转录的载体。3.作为蛋白质合成的机器—核糖体，毫无例外地存在于一切细胞内。4.所有细胞的增殖都以一分为二的方式进行分裂。第二节 非细胞形态的生命体 —病毒及其与细胞的关系一、病毒与细胞在起源与进化中的关系病毒是非细胞形态的生命体，它的主要生命活动必须要在细胞内实现。病毒与细胞在起源上的关系，目前存在3种主要观点:1.生物大分子→病毒→细胞 病毒2.生物大分子 细胞3.生物大分子→细胞→病毒现在来说，第二种观点和第三种观点比较容易接受，而且第三种观点越来越有说服力。认为病毒是细胞演化的产物的观点主要依据如下:彻底的寄生性；病毒核酸与哺乳动物细胞DNA某些片断的相似性；病毒可以看成是核酸与蛋白质形成的复合大分子。第三节 原核细胞与古核细胞一、Basic characteristics of Prokaryotic cell1. 遗传的信息量小，遗传信息载体仅由一个环状DNA或RNA构成；2. 细胞内没有分化为以膜为基础的具有专门结构与功能的细胞器和细胞核膜。二、原核细胞的主要代表1、支原体为什么说支原体是一个细胞（1）能在培养基上生长，具有典型的细胞膜；（2）具有环状的双螺旋DNA作为遗传信息量的载体；（3）mRNA与核糖体结合形成多聚核糖体，指导蛋白质的合成；（4）以一分为二的方式分裂繁殖。支原体是最小、最简单的细胞。2、细菌1）、细菌的三种形态:球状、杆状和螺旋状2)、细菌细胞的核区与基因组:细菌的核区实际主要由一个环状的DNA分子组成；现在也可以把细菌的环状DNA理解为细菌基因组。3）、细菌细胞的表面结构:A. 细胞膜:主要功能是选择性的交换物质----吸收营养物质，排出代谢废物，并且有分泌与运输蛋白的作用。B. 细胞壁: 所有细菌的细胞壁的共同成分是肽聚糖，由乙酰氨基葡萄糖、乙酰胞壁酸与四五个氨基酸短肽聚合而成的多层网状大分子结构。C. 细胞壁特化结构:a. 中膜体-----细胞膜内陷而形成的；b. 荚膜-----是一层松散的粘液物质，有一定程度的保护作用；c. 鞭毛-----细菌的运动器官，与真核生物的鞭毛不同，它是由一种称为鞭毛蛋白的弹性蛋白所构成。4）、细菌细胞的核糖体——部分附着在细胞膜内侧，大部分游离于细胞质中，与蛋白质的合成密切相关。5）、细菌细胞核外DNA------质粒，是裸露环状DNA，在遗传工程研究中很重要。6）、细菌细胞的内生孢子，即芽孢，是细菌对不良环境或营养耗尽时的反应。3. 蓝藻细胞:是最简单的自养植物类型之一。基本特征:1）中心质------相当于细菌的核区，是遗传物质DNA所在部位。2）光合片层-----位于细胞质部分，是同心环状的膜片层结构，上边附着有藻胆蛋白体（包括藻蓝蛋白，一藻蓝蛋白和藻红蛋白），能够把光能传递给叶绿素a，进行原始光和作用。3）细胞质内含物4）细胞表面结构5）细胞分裂四、原核细胞与真核细胞的比较1、原核细胞与真核细胞最根本的区别 :（1）、细胞膜系统的分化和演变。 细胞内部结构和职能的分工是真核细胞区别于原核细胞的重要标志。（2）、遗传信息量与遗传装置的扩增与复杂化。 遗传信息重复序列与染色体多倍性的出现是真核细胞区别于原核细胞的另一重要标志。（3）、真核细胞内，遗传信息的转录与翻译有严格的阶段性和区域性，而在原核细胞内则是转录与翻译可以同时发生五、原核细胞与真核细胞基本特征的比较（p36)六、原核细胞与真核细胞的遗传结构装置和基因表达的比较(p37)七、古细菌古细菌（archaebacteria）与真核细胞曾在进化上有过共同历程主要证据（1）细胞壁的成分与真核细胞一样，而非由含壁酸的肽聚糖构成，因此抑制壁酸合成的链霉素， 抑制肽聚糖前体合成的环丝氨酸，抑制肽聚糖合成的青霉素与万古霉素等对真细菌类有强的抑制生长作用，而对古细菌与真核细胞却无作用。（2）DNA与基因结构:古细菌DNA中有重复序列的存在。此外，多数古核细胞的基因组中存在内含子。（3）有类核小体结构:古细菌具有组蛋白，而且能与DNA构建成类似核小体结构。（4）有类似真核细胞的核糖体:多数古细菌类的核糖体较真细菌有增大趋势，含有60种以上蛋白，介于真核细胞（70～84）与真细菌（55）之间。抗生素同样不能抑制古核细胞类的核糖体的蛋白质合成。（5）5S rRNA:根据对5S rRNA的分子进化分析，认为古细菌与真核生物同属一类，而真细菌却与之差距甚远。5S rRNA二级结构的研究也说明很多古细菌与真核生物相似。第四节 真核细胞基本知识概要一、真核细胞的基本结构体系1.生物膜系统:以脂质及蛋白质成分为基础的生物膜结构系统；2.遗传信息表达结构系统:以核酸（DNA或RNA）与蛋白质为主要成分的遗传信息表达系统3.细胞骨架系统:由特异蛋白分子装配构成的细胞骨架系统。二、细胞的大小及其分析各类细胞直径的比较三、植物细胞与动物细胞的比较植物细胞特有的结构: 1. 细胞壁 2. 液泡 3. 叶绿体第三章 细胞生物学研究方法本章内容提要：第一节 细胞形态结构的观察方法第二节 细胞组分的分析方法第三节 细胞培养、细胞工程与显微操作技术第一节 细胞形态结构的观察方法一、光学显微镜技术（一）普通光学显微镜? 1. 构成：? ①照明系统? ②光学放大系统? ③机械装置? 2. 原理：经物镜形成倒立实像，经目镜进一步放大成像。? 3. 分辨率：指分辨物体最小间隔的能力。（二）荧光显微镜 Fluorescence microscope特点：光源为紫外线，波长较短，分辨力高于普通显微镜；有两个特殊的滤光片；照明方式通常为落射式。用于观察能激发出荧光的结构。用途：免疫荧光观察、基因定位、疾病诊断。（三）激光共聚焦扫描显微境Laser confocal scanning microscope, LCSM用激光作光源，逐点、逐行、逐面快速扫描。能显示细胞样品的立体结构。分辨力是普通光学显微镜的3倍。用途类似荧光显微镜，但能扫描不同层次，形成立体图像。（四）相差显微镜? 把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处。? 环形光阑（annular diaphragm）：位于光源与聚光器之间。? 相位板（annular phaseplate）：物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ。原理用途：观察未经染色的玻片标本（五）微分干涉差显微镜 Differential interference contrast microscope （DIC）? 1952年，Nomarski发明，利用两组平面偏振光的干涉，加强影像的明暗效果，能显示结构的三维立体投影。标本可略厚一点，折射率差别更大，故影像的立体感更强。二、电子显微镜1、电子显微镜的基本知识电镜与光镜的比较显微镜 分辨本领 光源 透镜 真空 成像原理LM 200nm 可见光（400-700） 玻璃透镜 不要求真空 利用样品对光的吸收形成明暗反差和颜色变化100nm 紫外光（约200nm) 玻璃透镜 不要求真空TEM 0.1nm 电子束（0.01-0.9） 电磁透镜 要求真空 利用样品对电子的散射和透射形成明暗反差2、 原理? 以电子束作光源，电磁场作透镜。电子束的波长短，并且波长与加速电压(通常50~120KV)的平方根成反比。? 由电子照明系统、电磁透镜成像系统、真空系统、记录系统、电源系统等5部分构成。? 分辨力0.2nm，放大倍数可达百万倍。? 用于观察超微结构（ultrastructure），即小于0.2μm、光学显微镜下无法看清的结构，又称亚显微结构（submicroscopic structures）。3、主要电镜制样技术? 1）超薄切片? 电子束穿透力很弱，用于电镜观察的标本须制成厚度仅50nm的超薄切片，用超薄切片机（ultramicrotome）制作。? 通常以锇酸和戊二醛固定样品，丙酮逐级脱水，环氧树脂包埋，以热膨胀或螺旋推进的方式切片，重金属（铀、铅）盐染色。? 2）负染技术用重金属盐(如磷钨酸)对铺展在载网上的样品染色；吸去染料，干燥后，样品凹陷处铺了一层重金属盐，而凸的出地方没有染料沉积，从而出现负染效果，分辨力可达1.5nm左右。3）冰冻蚀刻 freeze-etching? 亦称冰冻断裂。标本置于干冰或液氮中冰冻。然后断开，升温后，冰升华，暴露出了断面结构。向断裂面上喷涂一层蒸汽碳和铂。然后将组织溶掉，把碳和铂的膜剥下来，此膜即为复膜（replica）。三、扫描隧道显微镜scanning tunneling microscope，STM? 原理：根据隧道效应而设计，当原子尺度的针尖在不到一个纳米的高度上扫描样品时，此处电子云重叠，外加一电压（2mV~2V），针尖与样品之间形成隧道电流。电流强度与针尖和样品间的距离有函数关系，将扫描过程中电流的变化转换为图像，即可显示出原子水平的凹凸形态。? 分辨率：横向为0.1~0.2nm，纵向可达0.001nm。? 用途：三态（固态、液态和气态）物质均可进行观察。第二节 细胞组分的分析方法一、离心分离技术用途：于分离细胞器与生物大分子及其复合物转速为10~25kr/min的离心机称为高速离心机。转速>25kr/min，离心力>89Kg者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100000r/min，离心力超过500Kg。（一）差速离心 Differential centrifugation? 特点：– 介质密度均一；– 速度由低向高，逐级离心。? 用途：分离大小相差悬殊的细胞和细胞器。? 沉降顺序：核——线粒体——溶酶体与过氧化物酶体——内质网与高基体——核蛋白体。? 可将细胞器初步分离，常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。（二）密度梯度离心? 用介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过离心力场的作用使细胞分层、分离。? 类型：速度沉降（velocity sedimentation）、等密度沉降（isopycnic sedimentation）。? 常用介质：氯化铯、蔗糖、多聚蔗糖。? 分离活细胞的介质要求：– 1）能产生密度梯度，且密度高时，粘度不高；– 2）PH中性或易调为中性；– 3）浓度大时渗透压不大；– 4）对细胞无毒。二、 细胞内核酸、蛋白质、酶、糖与脂类等的显示方法?原理：利用一些显色剂与所检测物质中一些 特殊基团特异性结合的特征，通过显 色剂在细胞中的定位及颜色的深浅来判断某种物质在细胞中的分布和含量。Feulgen Staining三、特异蛋白抗原的定位与定性1、免疫荧光技术： 快速、灵敏、有特异性，但其分辨率有限2、蛋白电泳(SDS-PAGE)与免疫印迹反应(Western-Blot)3、免疫电镜技术：?免疫铁蛋白技术?免疫酶标技术应用：通过对分泌蛋白的定位，可以确定某种蛋白的分泌动态；胞内酶的研究；膜蛋白的定位与骨架蛋白的定位等四、细胞内特异核酸的定位与定性?光镜水平的原位杂交技术（同位素标记或荧光素标记的探针）?电镜水平的原位杂交技术（生物素标记的探针与抗生物素抗体相连的胶体金标记结合）?PCR技术五、放射自显影技术1、原理及应用：?利用同位素的放射自显影，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究；?实现对细胞内生物大分子进行动态和追踪研究。2、步骤：?前体物掺入细胞（标记：持续标记和脉冲标记）———放射自显影六、定量细胞化学分析技术1、显微分光光度术（Microspectrophotometry）?利用细胞内某些物质对特异光谱的吸收，测定这些物质（如核酸与蛋白质等）在细胞内的含量。包括： 紫外光显微分光光度测定法可见光显微分光光度测定法? 流式细胞仪（Flow Cytometry）?主要应用：用于定量测定细胞中的DNA、RNA或某一特异蛋白的含量；测定细胞群体中不同时相细胞的数量；从细胞群体中分离某些特异染色的细胞；分离DNA含量不同的中期染色体。第三节 细胞培养、细胞工程与显微操作技术一、细胞的培养1、动物细胞培养（1） 类型：A 原代培养细胞（primary culture cell)---从机体取出后立即 培养的细胞。1-10代以内的细胞培养称为原代培养细胞。B 继代培养细胞（sub-culture cell）---适宜在体外培养条件下持续传代培养的细胞称为传代培养细胞(2) 细胞株（cell strain） 正常二倍体，接触抑制.10~50代(3) 细胞系（cell line） 亚二倍体或非整倍体，接触抑制丧失，容易传代培养。50代以后。2、植物细胞（1）、 原生质体培养 （体细胞培养）（2）、单倍体细胞培养（花药培养）3、非细胞体系（cell-free system）：只来源于细胞，而不具有完整的细胞结构，但包含了进行正常生物学反应所需的物质组成体系。二、细胞工程1、细胞工程：在细胞水平上有计划的保存、改变和创造细胞遗传物质，以产生新的物种和品系，或大规模培养组织细胞以获得生物产品。其所使用的技术主要是：细胞培养、细胞分化的定向诱导、细胞融合与显微注射。2、细胞融合（cell fusion）与细胞杂交（cell hybridization）技术? 用人工方法把同种或不同种的两个或两个以上的细胞，通过介导物作用，融合成一个细胞的技术。亦称细胞杂交（cell hybridization）? 同核融合细胞? 异核融合细胞3、单克隆抗体（monoclone antibody）技术单克隆抗体技术? 正常淋巴细胞（如小鼠脾细胞）具有分泌抗体的能力，但不能长期培养，瘤细胞（如骨髓瘤）可以在体外长期培养，但不分泌抗体。于是英国人Kohler和Milstein 1975将两种细胞杂交而创立了单克隆抗体技术，获1984年诺贝尔奖。第四章 细胞质膜与细胞表面第一节 细胞质膜与细胞表面特化结构第二节 细胞连接第三节 细胞外被与细胞外基质第一节 细胞质膜与细胞表面特化结构? 细胞膜(cell membrane)又称质膜（plasma membrane），是指围绕在细胞最外层，由脂质和蛋白质组成的生物膜。细胞膜只是真核细胞生物膜的一部分，真核细胞的生物膜（biomembrane）包括细胞的内膜系统（细胞器膜和核膜）和细胞膜（cell membrane）。一、细胞膜的结构模型1、结构模型1） 三明治质膜结构模型: E.Gorter和F．Grendel（1925）, 提出 “protein-lipid-protein”三夹板或三明治质膜结构模型，这一模型影响20年之久。2） 单位膜模型(unit membrane model)：J.D.Robertson（1959年），提出单位膜模型，大胆的推断所有的生物膜都是由蛋白质-脂类-蛋白质单位膜构成，在电镜下观察，细胞膜显示出 暗---亮----暗三条带，两侧的暗带的厚度约2nm, 推测是蛋白质，中间的亮带厚度约3.5nm，推测是脂双层分子。整个膜的厚度约是7.5nm。3） 流动镶嵌模型(fluid mosaic model)： S.J.Singer和G.Nicolson（1972），提出生物膜的流动镶嵌模型(fluid mosaic model)，这种模型认为细胞膜是由脂质双分子层组成，蛋白质以不同的方式，镶嵌，覆盖或横跨双分子层。流动镶嵌模型强调了，a 膜的流动性，b 膜蛋白分布的不对称性。4） 脂筏模型（lipid rafts model）： K.Simons et al(1997)，提出了脂筏模型（lipid rafts model）Functional rafts in Cell membranes. Nature 387:569-572。2、生物膜结构目前对生物膜结构的认识可以归纳如下:1）磷脂双分子层是组成生物膜的基本结构成分,尚未发现膜结构中起组织作用的蛋白；2）蛋白分子以不同方式镶嵌在脂双层分子中或结合在其表面, 膜蛋白是赋予生物膜功能的主要决定者；3）生物膜可以看成是蛋白质在双层脂分子的二维溶液。二、生物膜的组成成分（一）、膜脂成分：膜脂主要包括磷脂、糖脂和胆固醇三种类型。? 1、磷脂：1）膜脂的基本成分（50％以上）? 2）分为二类: a 甘油磷脂（磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇）? b 鞘磷脂? 3) 主要特征：①具有一个极性头和两个非极性的尾(脂肪酸链) （心磷脂除外）；? ②脂肪酸碳链为偶数,多数碳链由16,18或20个组成；? ③既具有饱和脂肪酸(如软脂酸)又有不饱和脂肪酸(如油酸)；? 2、糖脂：糖脂普遍存在于原核和真核细胞的质膜上（5％以下）,神经细胞糖脂含量较高；? 3、胆固醇： 1）胆固醇存在于真核细胞膜上（30%以下），细菌质膜不含有胆固醇，但某些细菌的膜脂中含有甘油脂等中性脂类。? 2）胆固醇的作用：? ① 调节膜的流动性；? ② 增加膜的稳定性；? ③ 降低水溶性物质的通透性。（二）、膜脂的运动方式? 1、侧向运动： 沿膜平面的侧向运动（基本运动方式）? 2、自旋运动： 脂分子围绕轴心的自旋运动；? 3、 摆 动： 脂分子尾部的摆动；? 4、 翻转运动：双层脂分子之间的翻转运动，发生频率还不到脂分子侧向交换频率的? 10－10。但在内质网膜上,新合成的磷脂分子翻转运动发生频率很高。�? 1、定义：脂质体是根据磷脂分子可在水相中形成稳定的脂双层膜的趋势而制备的人工膜。三、膜蛋白（二）、膜内在蛋白与膜脂结合的方式1、膜蛋白的跨膜结构域与脂双层分子的疏水核心的相互作用。2、跨膜结构域两端携带正电荷的氨基酸残基与磷脂分子带负电的极性头形成离子键，或带负电的氨基酸残基通过Ca2+、Mg2+等阳离子与带负电的磷脂极性头相互作用。3、某些膜蛋白在细胞质基质一侧的半胱氨酸残基上共价结合脂肪酸分子,插入脂双层之间,进一步加强膜蛋白与脂双层的结合力,还有少数蛋白与糖脂共价结合。（三）、去垢剂1、定义：去垢剂是一端亲水、另一端疏水的两性小分子,是分离与研究膜蛋白的常用试剂。四、膜的流动性(sk)（一）、膜脂的流动性膜脂的流动性主要由1 脂分子本身的性质决定的,脂肪酸链越短, 不饱和程度越高,膜脂的流动性越大。2 温度对膜脂的运动有明显的影响。3 在细菌和动物细胞中常通过增加不饱和脂肪酸的含量来调节膜脂的相变温度以维持膜脂的流动性。4 在动物细胞中，胆固醇对膜的流动性起重要的双向调节作用。（二）、 膜蛋白的流动�荧光抗体免疫标记实验�成斑现象(patching)或成帽现象(capping) �（三）、膜的流动性受多种因素影响；细胞骨架不但影响膜蛋白的运动，也影响其周围的膜脂的流动。膜蛋白与膜脂分子的相互作用也是影响膜流动性的重要因素荧光抗体免疫标记实验（二）、膜脂与糖脂的不对称性�? 膜脂的不对称性：指同一种膜脂分子在膜的脂双层中呈不均匀分布；? 糖脂的不对称性：糖脂分子仅存在于质膜的ES面，是完成其生理功能的结构基础
一、是非题：15题，每题1分，共15分。答"是"写"+"，答"非"写"- "，写在题后的（）中。 1．维生素对人体的生长和健康是必需的，但人体不能合成维生素。 （ ） 2．能被某种振奋分子识别，并与其特异和共价结合的原子，原子团和分子，称为配基。 （ ） 3．当不同分子大小的蛋白质混合物流经凝胶柱层析时，小分子物质因体积小最先被洗脱出来。 （ ） 4．酶的最适pH与酶的等电点是两个不同的概念，但两者之间有相关性，两值通常比较接近或相同。 （ ） 5．对于一个酶而言，其过渡态的底物类似物与底物的物相比较，是更有效的竞争性抑制剂。 （ ） 6．Km值是酶的牲常数之一，与酶浓度、pH值、离子强度等条件或因素无关。 （ ） 7．磷脂酶A水解脂生成磷脂酸。 （ ） 8．NAD 不能由细胞浆通过线粒体内膜进入线柆体内，而NADH能在通过线粒体内膜后被氧化。 （ ） 9．寡霉素是线粒体ATP合成酶的抑制剂。 （ ） 10．核苷磷酸化酶催化腺苷的磷酸化，生成腺嘌呤和核糖-5-磷酸。 （ ） 12．肿瘤RNA病毒的复制过程为RNA->DNA->RNA。 （ ） 13．肾上腺素能与细胞膜上专一受体结合，这种激素 受体复合物能直接活化环化酶，使细胞cAMP浓度增加，引起级联反应。 （ ） 14．维生素E是一种抗氧化剂，对线体膜上的磷脂有抗自由的作用。 （ ） 15．吡哆醛、吡哆胺和吡哆醇的磷酸酯都可以作为转氨的辅酶。 （ ） 二、选择题：20题，每题1分，共20分。请将选择答案的号码填入（）中。 1．为稳定胶原三股螺旋结构，三联体的每三个氨基酸的位置必须是： （ ） ①丙氨酸； ②谷氨酸； ③甘氨酸 2．分离含胡二硫键的肽段可以用： （ ） ①SDS-PAGE电泳； ②对角线电泳； ③琼脂糖电泳 3．引起疯牛病（牛海绵脑病）的病原体是： （ ） ①一种DNA； ②一种RNA； ③一种蛋白质； ④一种多糖 4．胰岛素等激素的受体以及上成或表皮生长因子的受体都是一种： （ ） ①激酶； ②脱氢酶； ③转氨酶 5．在酶的可逆抑制剂中，不影响酶的二级常数（Kcat/Km）的是： （ ） ①竞争性抑制剂； ②非竞争性抑制剂； ③反竞争性抑制剂； ④都不是 6．“多酶体系”是指一个代谢过程中几个酶殗了一个反应链体系，多酶体系中的酶通常具有以下性质。 （ ） ① 只是在功能上相互有联系，在结构上互不相关，不存在相互作用； ② 不仅在功能上相互有联系，在结构上也有相互联系，形成复合体； ③ 上述两种情况都存在。 7．所谓“代谢物”指的是下面哪一条？ （ ） ① 特指代谢反应中的反应物； ② 特指代谢反应中的产物； ③ 特指代谢反应中的中间物； ④ 所有代谢反应中的反应物、中间物和产物都称为代谢物。 8．有的酶存在多种同工酶形式，这些同工酶所催化的反应： （ ） 中国科学院研究生院历年招收攻读硕士学位研究生入学统一考试试题 科目名称：生物化学与分子生物学 5 ① 并不完全相同； ② 完全相同，而且反应的平衡常数也相同； ③ 完全相同，但由于每种同工酶活性不同，反应平衡常数可以不相同。 9．脂肪肝是一种代谢疾病，它的产生主要是由于： （ ） ① 肝脏脂肪水解代谢障碍； ② 肝脏蛋白不能及时将肝细胞脂肪排出； ③ 肝脏细胞摄取过多游离脂肪酸； ④ 肝脏细胞膜脂肪酸载体异常 10．线粒体ATP/ADP交换载体在细胞内的作用是： （ ） ① 需能传送； ② 促进传送； ③ ATP、ADP的通道； ④ ATP水解酶 11．辅酶Q是线粒体内膜： （ ） ① NADH脱氢酶的辅酶； ② 琥珀酸脱氢酶的辅酶； ③ 二羧酸载体； ④ 呼吸链的氢载体 12．线粒体蛋白的跨膜传送是一种： （ ） ① 类似细胞膜的吞噬作用； ② 蛋白质解折叠后传送； ③ 通过对各个蛋白质专一的载体传送； ④ 膜内外同类蛋白质交换 13．Poly d（A-T）的Tm值较poly d（G C）为： （ ） ① 高； ②低； ③相同 14．反密码子为IGC，可识别密码子： （ ） ① GCA；； ②GCG；； ③ACG 15．RNA形成二级结构的碱基对，除了A-U和G-C外，还有： （ ） ① A C ②A G ③G U 16．RNA用强碱水解，产生： （ ） ① 2'和5'核苷酸混合物； ② 2'和3'核苷酸混合物； ③ 3'和5'核苷酸混合物； 17．能与受体结合，形成激素 受体复合物，进入细胞核调节基因表达的激素是： （ ） ① 甲状腺素 ② 肾上腺素； ③ 溏皮质激素； ④ 前列腺素 18．原核生物基因转终止子在终止点前均有： （ ） ① 回文结构； ② 多聚A序列； ③ TATA序列； ④ 多聚T序列 19．能专门水解DNA RNA杂交分子中RNA的酶是 （ ） ① DNA聚合酶I； ② 逆转录酶； ③ Rnase A； ④ 核酸外切酶III 20．真核生物中，存在于核仁中的RNA聚合酶是： （ ） ① RNA聚合酶I； ②RNA聚合酶II； ③RNA聚合酶III 三、填空题：9题，每空格答对1分，共15分 1． 已知三种超二级结构的基本组合形式______，______，______。 2． Western印迹法的原理是用______鉴定蛋白质的一种方法。 3． 酶容易失活，如何保存酶制品是一个很重要的问题。通常酶制品的保存方法有______和______等。 4． 红细胞膜带3蛋白是一种______。 5． 肝素是一种________，它的主要药理作用是________。 6． 细胞核内除了DNA外，还发现至少有二类小分子RNA，它们是核小分子RNA和________。 7． 核酸变性时，紫上吸收值增高，叫________效应。 8． 限制性内切酶特异识别和切割DNA分子中的回文结构，形成末端有粘性末端和________末端。 中国科学院研究生院历年招收攻读硕士学位研究生入学统一考试试题 科目名称：生物化学与分子生物学 6 9． 内质网分为两种类型，一种是粗糙内质网，为________的场所；另一种为光滑型内质网，与________和________合成有关。 四、问答题：10题，每题5分，共50分。 1． 根据氨基酸通式的R基团极性性质，20种常见的氨基酸可分成哪四类？ 2． 简述蛋白质翻译后的加工过程。 3． 葡萄糖酵解过程的第一步是葡萄糖磷酸化形成6-磷酸葡萄糖，催化这一步反应有两种酶，已糖激酶和葡萄糖激酶。己糖激酶对葡萄糖的Km值远低于平时细胞内葡萄糖浓度，而葡萄糖激酶的Km值比较接近平时细胞内葡萄糖浓度。此外，己糖激酶受6-磷酸葡萄糖强烈抑制，而葡萄糖激酶不受6-磷酸葡萄糖的抑制。——上述描述，请你说明两种酶在调节上的特点是什么？ 4． 请解释什么是酶的活力和酶的比活力，并说出活力的比活力两个指标在酶的纯化过程中分别可以反映什么？ 5． 写出葡萄糖酵解生成丙酮酸过程中的步骤（写出九步即可）。（A卷此题不同，大概是脂肪肝的病机） 6． 写出氧化磷酸化的五个作用部位不同的抑制剂，并写出各处的抑制部位。 7． 真核生物mRNA的3'末端有一段poly（A），5'末端有一个“帽子”，“帽子”的结构特点是什么？ 8． 5-磷酸核糖-1-焦磷酸（PRPP）是一个重要的代谢中间物，试举出二个反应合例子。 9． 试列出tRNA分子上与多肽合成有关的位点。 10。真核生物转录前水平的基因调节主要有哪些方式？中国科学院研究生院2002年硕士研究生入学考试 科目名称：生物化学与分子生物学（答案） 一、判断题 1 - 2 - 3 - 4 - 5 + 6 - 7 - 生成溶血磷脂 8 - 9 + 10 - 11 12 -有的为RNA->RNA 13 - 14 + 15 - 二、选择题 1 C 2 B 3 C 4 A 5 C 6 C 7 D 8 C 9 B 10 A 11 D 12 B 13 B 14 A 15 C 16 B 17 C 18 A 19 B 20 A 三、填空题 1、αα、ββ、βαβ 2、抗原抗体结合的专一性 3、低温 干燥 4、糖蛋白（阴离子交换蛋白） 5、多聚阴离子 抗凝血 6、snoRNA 7、增色效应 8、平末端 9、光面内质网 脂质 胆固醇 四、简答题 1、不带电荷的极性氨基酸、带正电荷的极性氨基酸、带负电荷的极性氨基酸、非极性氨基酸。 2、（1）末端端修饰 细菌的多肽N末端都是甲酰甲硫氨酸，真核生物的多肽N末端都是甲硫氨酸，通常N末端的甲酰甲硫氨酸或甲硫氨酸以及更多的N末端氨基酸残基都要被除去。真核生物的多肽的N末端残基还要进一步的乙醇化。羧基端的再修饰也时有发生。 （2）切除信号序列。 （3）非末端氨基酸的修饰 丝氨酸、苏氨酸残基的磷酸化；赖氨酸、谷氨酸残基的甲基化；谷氨酸、天冬氨酸的羧基化。 （4）糖基化工厂 糖蛋白的末冬酰氨，丝氨酸、苏氨酸和糖基结合。 （5）附加异戊二烯基团。许多真核生物蛋白质的半胱氨酸残基和异戊二烯基团以硫醚键结合。 （6）添加辅基 这些辅基和解键共价结合，如血红素，叶绿素、生物素等。 （7）前体修饰。有些蛋白生物合成时是以前体蛋白或多蛋白形式出现的要通过蛋白酶的切割，成为较小的活性分子。 （8）形成二硫键 3、同一种底物的同一种反应，有两种酶存在，但两种酶的活性调节能力不同：已糖激酶对6-碳糖不加选择，肌肉中的已糖激酶为别构酶，特别受其产物6-磷酸葡萄糖的强烈负反馈抵制；葡萄糖激酶则对D-葡萄糖有专一性，为诱导酶，活性不被6-磷酸葡萄糖抑制，在进食后血糖升高时，可以促使葡萄糖转变成糖原储存起来。 4、酶活力也叫酶活性，可以用酶活力单位表示，酶活力是由酶自身催化一定反应的的能力决定的，比活力是指单位质量的酶制剂的酶活力单位数，酶的比活力反应酶的纯度。 5、生化下P67 6、生化下P129 7、真核生物mRNA的5'端有一个帽子结构。这一结构的最大特点是7-甲基鸟嘌呤核苷和mRNA的5'端通过5'-5'三磷酸酯键相连，另外靠近这一帽子结构的第一和第二核苷酸的2„羟基甲基化；真核mRNA的3„末端有一个多聚A尾，这些结构都是转录后加上去的。 8、生化下P393 P397 9、有4个关键的位点 （1）反密码子 （2）携带氨基酸的3‟末端的氨基酸臂 （3）和核糖体上的蛋白质相互作用的二氢鸟嘧啶环和TΨC环 （4）氨酰t-RNA合成酶的结合位点 10、生化下P571
细胞膜脂不饱和度升高还是降低？？答：当然是升高。冬季温度低，必须增加膜脂的不饱和程度，才能对抗低温。不至于细胞膜由液晶态转变为固态。是的，不能考虑的这么简单。但是，它就是考察一个知识点：生物膜的流动性跟膜脂不饱和程度的关系。从生物进化的角度看，这也是生物适应环境变化的一种方式。然后，你再回答一下生物膜的流动性对于细胞维持正常的功能有什么意义。——————————————————————————————————————————————————只有你抓住了老师想考你的知识点在哪里，评卷时老师才会很欣慰的给你满分。一要准确；二要全面。这是研究生阶段必须具备的思维能力。老师也是喜欢要这样的研究生。
核被膜所具有的功能
一方面，核被膜构成了核、质之间的天然选择性屏障，将细胞分成核与质两大结构与功能区域，使得DNA复制、RNA转录与加工在核内进行，而蛋白质翻译则局限在细胞质中。这样既避免了核质问彼此相互干扰，使细胞的生命活动秩序更加井然，同时还能保护核内的DNA分子免受损伤。
另一方面，核被膜调控细胞核内外的物质交换和信息交流。核被膜并不是完全封闭的，核质之间进行着频繁的物质交换与信息交流。这些物质交换与信息交流主要是通过核被膜上的核孔复合体进行的。
核被膜的结构组成及特点
(1)核被膜由内外两层平行但不连续的单位膜构成。面向核质的一层膜被称作内(层)核膜，而面向胞质的另一层膜称为外(层)核膜。两层膜厚度相同，约为7.5 nm。两层膜之间有20～40nm的透明空隙，称为核周间隙或核周池。核周间隙宽度随细胞种类不同而异，并随细胞的功能状态而改变。
(2)核被膜的内外核膜各有特点：①外核膜表面常附有核糖体颗粒，且常常与糙面内质网相连，使核周间隙与内质网腔彼此相通。从这种结构上的联系出发，外核膜可以被看作是糙面内质网的一个特化区域。②内核膜表面光滑，无核糖体颗粒附着，但紧贴其内表面有一层致密的纤维网络结构，即核纤层。内核膜上有一些特有的蛋白成分，如核纤层蛋白B受体。③双层核膜互相平行但并不连续，内、外核膜常常在某些部位相互融合形成环状开口，称为核孔，：在核孔上镶嵌着一种复杂的结构，叫做核孔复合体。核孔周围的核膜特称为孔膜区，它也有一些特有的蛋白成分。
复习资料很多，下面的只是一部分第一章 绪论细胞生物学从显微水平、超微水平和分子水平等不同层次研究细胞结构、功能及生活史。细胞生物学由细胞学Cytology发展而来，Cytology是指对细胞形态（特别是染色体形态）的观察。在我国的基础学科发展规划中，细胞生物学与分子生物学，神经生物学和生态学并列为生命科学的四大基础学科。第一章 绪论本章内容提要:第一节 细胞生物学研究的内容与现状一、 细胞生物学是现代生命科学的重要基础学科二、细胞生物学的主要研究内容三、当前细胞生物学研究的总趋势与重点领域第二节 细胞学与细胞生物学发展简史附录 细胞生物学参考书:第一节 细胞生物学研究的内容与现状一、 细胞生物学是现代生命科学的重要基础学科生命体是多层次、非线性、多侧面的复杂结构体系，而细胞是生命体的结构与生命活动的基本单位，有了细胞才有完整的生命活动。细胞生物学 是研究细胞基本生命活动规律的科学，它是在不同层次（显微、亚显微与分子水平）上以研究细胞结构与功能、细胞增殖、分化、衰老与凋亡、细 胞信号传递、真核细胞基因表达与调控、细胞起源与进化等为主要内容。核心问题是将遗传与发育在细胞水平上结合起来。二、细胞生物学的主要研究内容1、细胞核、染色体以及基因表达的研究2、生物膜与细胞器的研究3、细胞骨架体系的研究4、细胞增殖及其调控5、细胞分化及其调控6、细胞的衰老与凋亡7、细胞的起源与进化8、细胞工程三、当前细胞生物学研究的总趋势与重点领域1、细胞生物学研究的总趋势细胞生物学与分子生物学(包括分子遗传学与生物化学) 相互渗透与交融是总的发展趋势；当前细胞生物学研究中的三大基本问题:（1）、细胞内基因组是如何在时间和空间上有序表达的？（2）、基因表达产物----主要是结构蛋白、核酸、脂质、多糖及其复合物，他们如何逐级装备成能行使生命活动的基本结构体系及各种细胞器？（3）、基因表达产物----主要是大量活性因子与信号分子，他们是如何调节细胞最重要的生命活动过程的？2 、当前细胞基本生命活动研究中的重要领域:（1）、染色体DNA与蛋白质相互作用关系-----主要是非组蛋白对基因组的作用；（2）、细胞增值、分化、凋亡的相互关系及其调控；（3）、细胞信号转导的研究；（4）、细胞结构体系的装配。3、细胞重大生命活动的相互关系第二节 细胞学与细胞生物学发展简史一、生物科学发展的三个阶段:1.形态描述生物学时期，19世纪以前；2.实验生物学时期，20世纪前半世纪；3.分子生物学时期，20世纪50-60年代至今。二、细胞生物学发展简史1. 细胞的发现2. 细胞学说的建立其意义细胞学说内容:1） 认为细胞是有机体，一切动植物都是由细胞发育而来,并由细胞和细胞产物所构成；2） 每个细胞作为一个相对独立的单位，既有它“自己的”生命,又对与其它细胞共同组成的整体的生命有所助益；3） 新的细胞可以通过老的细胞繁殖产生。3. 细胞学的经典时期1）原生质理论的提出2）细胞分裂的研究3）重要细胞器的发现4. 实验细胞学与细胞学的分支及其发展1）细胞遗传学的发展2）细胞生理学的研究3）细胞化学5. 细胞生物学学科的形成与发展三、细胞学说Jean-Baptiste de Lamark （1744~1829)，获得性遗传理论的创始人，法国退伍陆军中尉，50岁成为巴黎动物学教授，1809年他认为只有具有细胞的机体，才有生命。Charles Brisseau Milbel（1776~1854)，法国植物学家，1802年认为植物的每一部分都有细胞存在， Henri Dutrochet （1776~1847），法国生理学家，1824年进一步描述了细胞的原理，Matthias Jacob Schleiden（1804~1881)，德国植物学教授，1838年发表“植物发生论”(Beitr?ge zur Phytogenesis)，认为无论怎样复杂的植物都有形形色色的细胞构成。Theodor Schwann（1810~1882)，德国解剖学教授，一开始就研究Schleiden的细胞形成学说，并于1838年提出了“细胞学说”（Cell Theory)这个术语；1939年发表了“关于动植物结构和生长一致性的显微研究”Schwann提出:有机体是由细胞构成的；细胞是构成有机体的基本单位。1855 德国人R. Virchow 提出“一切细胞来源于细胞”（omnis cellula e cellula）的著名论断；进一步完善了细胞学说。把细胞作为生命的一般单位，以及作为动植物界生命现象的共同基础的这种概念立即受到了普遍的接受。恩格斯将细胞学说誉为19世纪的三大发现之一第二章 细胞基本知识概要本章内容提要:第一节 细胞的基本概念第二节 非细胞形态的生命体-------病毒及其与细胞的关系第三节 原核细胞与古核细胞第四节 真核细胞基本知识概要第一节 细胞的基本概念一、细胞是生命活动的基本单位1、一切有机体都由细胞构成，细胞是构成有机体的基本单位；2、细胞具有独立的、有序的自控代谢体系，细胞是代谢与功能的基本单位3、细胞是有机体生长与发育的基础4、细胞是遗传的基本单位，细胞具有遗传的全能性5、没有细胞就没有完整的生命二、细胞的基本共性1.所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质构成的生物膜，即细胞膜。2.所有的细胞都含有两种核酸:即DNA与RNA作为遗传信息复制与转录的载体。3.作为蛋白质合成的机器—核糖体，毫无例外地存在于一切细胞内。4.所有细胞的增殖都以一分为二的方式进行分裂。第二节 非细胞形态的生命体 —病毒及其与细胞的关系一、病毒与细胞在起源与进化中的关系病毒是非细胞形态的生命体，它的主要生命活动必须要在细胞内实现。病毒与细胞在起源上的关系，目前存在3种主要观点:1.生物大分子→病毒→细胞 病毒2.生物大分子 细胞3.生物大分子→细胞→病毒现在来说，第二种观点和第三种观点比较容易接受，而且第三种观点越来越有说服力。认为病毒是细胞演化的产物的观点主要依据如下:彻底的寄生性；病毒核酸与哺乳动物细胞DNA某些片断的相似性；病毒可以看成是核酸与蛋白质形成的复合大分子。第三节 原核细胞与古核细胞一、Basic characteristics of Prokaryotic cell1. 遗传的信息量小，遗传信息载体仅由一个环状DNA或RNA构成；2. 细胞内没有分化为以膜为基础的具有专门结构与功能的细胞器和细胞核膜。二、原核细胞的主要代表1、支原体为什么说支原体是一个细胞（1）能在培养基上生长，具有典型的细胞膜；（2）具有环状的双螺旋DNA作为遗传信息量的载体；（3）mRNA与核糖体结合形成多聚核糖体，指导蛋白质的合成；（4）以一分为二的方式分裂繁殖。支原体是最小、最简单的细胞。2、细菌1）、细菌的三种形态:球状、杆状和螺旋状2)、细菌细胞的核区与基因组:细菌的核区实际主要由一个环状的DNA分子组成；现在也可以把细菌的环状DNA理解为细菌基因组。3）、细菌细胞的表面结构:A. 细胞膜:主要功能是选择性的交换物质----吸收营养物质，排出代谢废物，并且有分泌与运输蛋白的作用。B. 细胞壁: 所有细菌的细胞壁的共同成分是肽聚糖，由乙酰氨基葡萄糖、乙酰胞壁酸与四五个氨基酸短肽聚合而成的多层网状大分子结构。C. 细胞壁特化结构:a. 中膜体-----细胞膜内陷而形成的；b. 荚膜-----是一层松散的粘液物质，有一定程度的保护作用；c. 鞭毛-----细菌的运动器官，与真核生物的鞭毛不同，它是由一种称为鞭毛蛋白的弹性蛋白所构成。4）、细菌细胞的核糖体——部分附着在细胞膜内侧，大部分游离于细胞质中，与蛋白质的合成密切相关。5）、细菌细胞核外DNA------质粒，是裸露环状DNA，在遗传工程研究中很重要。6）、细菌细胞的内生孢子，即芽孢，是细菌对不良环境或营养耗尽时的反应。3. 蓝藻细胞:是最简单的自养植物类型之一。基本特征:1）中心质------相当于细菌的核区，是遗传物质DNA所在部位。2）光合片层-----位于细胞质部分，是同心环状的膜片层结构，上边附着有藻胆蛋白体（包括藻蓝蛋白，一藻蓝蛋白和藻红蛋白），能够把光能传递给叶绿素a，进行原始光和作用。3）细胞质内含物4）细胞表面结构5）细胞分裂四、原核细胞与真核细胞的比较1、原核细胞与真核细胞最根本的区别 :（1）、细胞膜系统的分化和演变。 细胞内部结构和职能的分工是真核细胞区别于原核细胞的重要标志。（2）、遗传信息量与遗传装置的扩增与复杂化。 遗传信息重复序列与染色体多倍性的出现是真核细胞区别于原核细胞的另一重要标志。（3）、真核细胞内，遗传信息的转录与翻译有严格的阶段性和区域性，而在原核细胞内则是转录与翻译可以同时发生五、原核细胞与真核细胞基本特征的比较（p36)六、原核细胞与真核细胞的遗传结构装置和基因表达的比较(p37)七、古细菌古细菌（archaebacteria）与真核细胞曾在进化上有过共同历程主要证据（1）细胞壁的成分与真核细胞一样，而非由含壁酸的肽聚糖构成，因此抑制壁酸合成的链霉素， 抑制肽聚糖前体合成的环丝氨酸，抑制肽聚糖合成的青霉素与万古霉素等对真细菌类有强的抑制生长作用，而对古细菌与真核细胞却无作用。（2）DNA与基因结构:古细菌DNA中有重复序列的存在。此外，多数古核细胞的基因组中存在内含子。（3）有类核小体结构:古细菌具有组蛋白，而且能与DNA构建成类似核小体结构。（4）有类似真核细胞的核糖体:多数古细菌类的核糖体较真细菌有增大趋势，含有60种以上蛋白，介于真核细胞（70～84）与真细菌（55）之间。抗生素同样不能抑制古核细胞类的核糖体的蛋白质合成。（5）5S rRNA:根据对5S rRNA的分子进化分析，认为古细菌与真核生物同属一类，而真细菌却与之差距甚远。5S rRNA二级结构的研究也说明很多古细菌与真核生物相似。第四节 真核细胞基本知识概要一、真核细胞的基本结构体系1.生物膜系统:以脂质及蛋白质成分为基础的生物膜结构系统；2.遗传信息表达结构系统:以核酸（DNA或RNA）与蛋白质为主要成分的遗传信息表达系统3.细胞骨架系统:由特异蛋白分子装配构成的细胞骨架系统。二、细胞的大小及其分析各类细胞直径的比较三、植物细胞与动物细胞的比较植物细胞特有的结构: 1. 细胞壁 2. 液泡 3. 叶绿体第三章 细胞生物学研究方法本章内容提要：第一节 细胞形态结构的观察方法第二节 细胞组分的分析方法第三节 细胞培养、细胞工程与显微操作技术第一节 细胞形态结构的观察方法一、光学显微镜技术（一）普通光学显微镜? 1. 构成：? ①照明系统? ②光学放大系统? ③机械装置? 2. 原理：经物镜形成倒立实像，经目镜进一步放大成像。? 3. 分辨率：指分辨物体最小间隔的能力。（二）荧光显微镜 Fluorescence microscope特点：光源为紫外线，波长较短，分辨力高于普通显微镜；有两个特殊的滤光片；照明方式通常为落射式。用于观察能激发出荧光的结构。用途：免疫荧光观察、基因定位、疾病诊断。（三）激光共聚焦扫描显微境Laser confocal scanning microscope, LCSM用激光作光源，逐点、逐行、逐面快速扫描。能显示细胞样品的立体结构。分辨力是普通光学显微镜的3倍。用途类似荧光显微镜，但能扫描不同层次，形成立体图像。（四）相差显微镜? 把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处。? 环形光阑（annular diaphragm）：位于光源与聚光器之间。? 相位板（annular phaseplate）：物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ。原理用途：观察未经染色的玻片标本（五）微分干涉差显微镜 Differential interference contrast microscope （DIC）? 1952年，Nomarski发明，利用两组平面偏振光的干涉，加强影像的明暗效果，能显示结构的三维立体投影。标本可略厚一点，折射率差别更大，故影像的立体感更强。二、电子显微镜1、电子显微镜的基本知识电镜与光镜的比较显微镜 分辨本领 光源 透镜 真空 成像原理LM 200nm 可见光（400-700） 玻璃透镜 不要求真空 利用样品对光的吸收形成明暗反差和颜色变化100nm 紫外光（约200nm) 玻璃透镜 不要求真空TEM 0.1nm 电子束（0.01-0.9） 电磁透镜 要求真空 利用样品对电子的散射和透射形成明暗反差2、 原理? 以电子束作光源，电磁场作透镜。电子束的波长短，并且波长与加速电压(通常50~120KV)的平方根成反比。? 由电子照明系统、电磁透镜成像系统、真空系统、记录系统、电源系统等5部分构成。? 分辨力0.2nm，放大倍数可达百万倍。? 用于观察超微结构（ultrastructure），即小于0.2μm、光学显微镜下无法看清的结构，又称亚显微结构（submicroscopic structures）。3、主要电镜制样技术? 1）超薄切片? 电子束穿透力很弱，用于电镜观察的标本须制成厚度仅50nm的超薄切片，用超薄切片机（ultramicrotome）制作。? 通常以锇酸和戊二醛固定样品，丙酮逐级脱水，环氧树脂包埋，以热膨胀或螺旋推进的方式切片，重金属（铀、铅）盐染色。? 2）负染技术用重金属盐(如磷钨酸)对铺展在载网上的样品染色；吸去染料，干燥后，样品凹陷处铺了一层重金属盐，而凸的出地方没有染料沉积，从而出现负染效果，分辨力可达1.5nm左右。3）冰冻蚀刻 freeze-etching? 亦称冰冻断裂。标本置于干冰或液氮中冰冻。然后断开，升温后，冰升华，暴露出了断面结构。向断裂面上喷涂一层蒸汽碳和铂。然后将组织溶掉，把碳和铂的膜剥下来，此膜即为复膜（replica）。三、扫描隧道显微镜scanning tunneling microscope，STM? 原理：根据隧道效应而设计，当原子尺度的针尖在不到一个纳米的高度上扫描样品时，此处电子云重叠，外加一电压（2mV~2V），针尖与样品之间形成隧道电流。电流强度与针尖和样品间的距离有函数关系，将扫描过程中电流的变化转换为图像，即可显示出原子水平的凹凸形态。? 分辨率：横向为0.1~0.2nm，纵向可达0.001nm。? 用途：三态（固态、液态和气态）物质均可进行观察。第二节 细胞组分的分析方法一、离心分离技术用途：于分离细胞器与生物大分子及其复合物转速为10~25kr/min的离心机称为高速离心机。转速>25kr/min，离心力>89Kg者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100000r/min，离心力超过500Kg。（一）差速离心 Differential centrifugation? 特点：– 介质密度均一；– 速度由低向高，逐级离心。? 用途：分离大小相差悬殊的细胞和细胞器。? 沉降顺序：核——线粒体——溶酶体与过氧化物酶体——内质网与高基体——核蛋白体。? 可将细胞器初步分离，常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。（二）密度梯度离心? 用介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过离心力场的作用使细胞分层、分离。? 类型：速度沉降（velocity sedimentation）、等密度沉降（isopycnic sedimentation）。? 常用介质：氯化铯、蔗糖、多聚蔗糖。? 分离活细胞的介质要求：– 1）能产生密度梯度，且密度高时，粘度不高；– 2）PH中性或易调为中性；– 3）浓度大时渗透压不大；– 4）对细胞无毒。二、 细胞内核酸、蛋白质、酶、糖与脂类等的显示方法?原理：利用一些显色剂与所检测物质中一些 特殊基团特异性结合的特征，通过显 色剂在细胞中的定位及颜色的深浅来判断某种物质在细胞中的分布和含量。Feulgen Staining三、特异蛋白抗原的定位与定性1、免疫荧光技术： 快速、灵敏、有特异性，但其分辨率有限2、蛋白电泳(SDS-PAGE)与免疫印迹反应(Western-Blot)3、免疫电镜技术：?免疫铁蛋白技术?免疫酶标技术应用：通过对分泌蛋白的定位，可以确定某种蛋白的分泌动态；胞内酶的研究；膜蛋白的定位与骨架蛋白的定位等四、细胞内特异核酸的定位与定性?光镜水平的原位杂交技术（同位素标记或荧光素标记的探针）?电镜水平的原位杂交技术（生物素标记的探针与抗生物素抗体相连的胶体金标记结合）?PCR技术五、放射自显影技术1、原理及应用：?利用同位素的放射自显影，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究；?实现对细胞内生物大分子进行动态和追踪研究。2、步骤：?前体物掺入细胞（标记：持续标记和脉冲标记）———放射自显影六、定量细胞化学分析技术1、显微分光光度术（Microspectrophotometry）?利用细胞内某些物质对特异光谱的吸收，测定这些物质（如核酸与蛋白质等）在细胞内的含量。包括： 紫外光显微分光光度测定法可见光显微分光光度测定法? 流式细胞仪（Flow Cytometry）?主要应用：用于定量测定细胞中的DNA、RNA或某一特异蛋白的含量；测定细胞群体中不同时相细胞的数量；从细胞群体中分离某些特异染色的细胞；分离DNA含量不同的中期染色体。第三节 细胞培养、细胞工程与显微操作技术一、细胞的培养1、动物细胞培养（1） 类型：A 原代培养细胞（primary culture cell)---从机体取出后立即 培养的细胞。1-10代以内的细胞培养称为原代培养细胞。B 继代培养细胞（sub-culture cell）---适宜在体外培养条件下持续传代培养的细胞称为传代培养细胞(2) 细胞株（cell strain） 正常二倍体，接触抑制.10~50代(3) 细胞系（cell line） 亚二倍体或非整倍体，接触抑制丧失，容易传代培养。50代以后。2、植物细胞（1）、 原生质体培养 （体细胞培养）（2）、单倍体细胞培养（花药培养）3、非细胞体系（cell-free system）：只来源于细胞，而不具有完整的细胞结构，但包含了进行正常生物学反应所需的物质组成体系。二、细胞工程1、细胞工程：在细胞水平上有计划的保存、改变和创造细胞遗传物质，以产生新的物种和品系，或大规模培养组织细胞以获得生物产品。其所使用的技术主要是：细胞培养、细胞分化的定向诱导、细胞融合与显微注射。2、细胞融合（cell fusion）与细胞杂交（cell hybridization）技术? 用人工方法把同种或不同种的两个或两个以上的细胞，通过介导物作用，融合成一个细胞的技术。亦称细胞杂交（cell hybridization）? 同核融合细胞? 异核融合细胞3、单克隆抗体（monoclone antibody）技术单克隆抗体技术? 正常淋巴细胞（如小鼠脾细胞）具有分泌抗体的能力，但不能长期培养，瘤细胞（如骨髓瘤）可以在体外长期培养，但不分泌抗体。于是英国人Kohler和Milstein 1975将两种细胞杂交而创立了单克隆抗体技术，获1984年诺贝尔奖。第四章 细胞质膜与细胞表面第一节 细胞质膜与细胞表面特化结构第二节 细胞连接第三节 细胞外被与细胞外基质第一节 细胞质膜与细胞表面特化结构? 细胞膜(cell membrane)又称质膜（plasma membrane），是指围绕在细胞最外层，由脂质和蛋白质组成的生物膜。细胞膜只是真核细胞生物膜的一部分，真核细胞的生物膜（biomembrane）包括细胞的内膜系统（细胞器膜和核膜）和细胞膜（cell membrane）。一、细胞膜的结构模型1、结构模型1） 三明治质膜结构模型: E.Gorter和F．Grendel（1925）, 提出 “protein-lipid-protein”三夹板或三明治质膜结构模型，这一模型影响20年之久。2） 单位膜模型(unit membrane model)：J.D.Robertson（1959年），提出单位膜模型，大胆的推断所有的生物膜都是由蛋白质-脂类-蛋白质单位膜构成，在电镜下观察，细胞膜显示出 暗---亮----暗三条带，两侧的暗带的厚度约2nm, 推测是蛋白质，中间的亮带厚度约3.5nm，推测是脂双层分子。整个膜的厚度约是7.5nm。3） 流动镶嵌模型(fluid mosaic model)： S.J.Singer和G.Nicolson（1972），提出生物膜的流动镶嵌模型(fluid mosaic model)，这种模型认为细胞膜是由脂质双分子层组成，蛋白质以不同的方式，镶嵌，覆盖或横跨双分子层。流动镶嵌模型强调了，a 膜的流动性，b 膜蛋白分布的不对称性。4） 脂筏模型（lipid rafts model）： K.Simons et al(1997)，提出了脂筏模型（lipid rafts model）Functional rafts in Cell membranes. Nature 387:569-572。2、生物膜结构目前对生物膜结构的认识可以归纳如下:1）磷脂双分子层是组成生物膜的基本结构成分,尚未发现膜结构中起组织作用的蛋白；2）蛋白分子以不同方式镶嵌在脂双层分子中或结合在其表面, 膜蛋白是赋予生物膜功能的主要决定者；3）生物膜可以看成是蛋白质在双层脂分子的二维溶液。二、生物膜的组成成分（一）、膜脂成分：膜脂主要包括磷脂、糖脂和胆固醇三种类型。? 1、磷脂：1）膜脂的基本成分（50％以上）? 2）分为二类: a 甘油磷脂（磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇）? b 鞘磷脂? 3) 主要特征：①具有一个极性头和两个非极性的尾(脂肪酸链) （心磷脂除外）；? ②脂肪酸碳链为偶数,多数碳链由16,18或20个组成；? ③既具有饱和脂肪酸(如软脂酸)又有不饱和脂肪酸(如油酸)；? 2、糖脂：糖脂普遍存在于原核和真核细胞的质膜上（5％以下）,神经细胞糖脂含量较高；? 3、胆固醇： 1）胆固醇存在于真核细胞膜上（30%以下），细菌质膜不含有胆固醇，但某些细菌的膜脂中含有甘油脂等中性脂类。? 2）胆固醇的作用：? ① 调节膜的流动性；? ② 增加膜的稳定性；? ③ 降低水溶性物质的通透性。（二）、膜脂的运动方式? 1、侧向运动： 沿膜平面的侧向运动（基本运动方式）? 2、自旋运动： 脂分子围绕轴心的自旋运动；? 3、 摆 动： 脂分子尾部的摆动；? 4、 翻转运动：双层脂分子之间的翻转运动，发生频率还不到脂分子侧向交换频率的? 10－10。但在内质网膜上,新合成的磷脂分子翻转运动发生频率很高。�? 1、定义：脂质体是根据磷脂分子可在水相中形成稳定的脂双层膜的趋势而制备的人工膜。三、膜蛋白（二）、膜内在蛋白与膜脂结合的方式1、膜蛋白的跨膜结构域与脂双层分子的疏水核心的相互作用。2、跨膜结构域两端携带正电荷的氨基酸残基与磷脂分子带负电的极性头形成离子键，或带负电的氨基酸残基通过Ca2+、Mg2+等阳离子与带负电的磷脂极性头相互作用。3、某些膜蛋白在细胞质基质一侧的半胱氨酸残基上共价结合脂肪酸分子,插入脂双层之间,进一步加强膜蛋白与脂双层的结合力,还有少数蛋白与糖脂共价结合。（三）、去垢剂1、定义：去垢剂是一端亲水、另一端疏水的两性小分子,是分离与研究膜蛋白的常用试剂。四、膜的流动性(sk)（一）、膜脂的流动性膜脂的流动性主要由1 脂分子本身的性质决定的,脂肪酸链越短, 不饱和程度越高,膜脂的流动性越大。2 温度对膜脂的运动有明显的影响。3 在细菌和动物细胞中常通过增加不饱和脂肪酸的含量来调节膜脂的相变温度以维持膜脂的流动性。4 在动物细胞中，胆固醇对膜的流动性起重要的双向调节作用。（二）、 膜蛋白的流动�荧光抗体免疫标记实验�成斑现象(patching)或成帽现象(capping) �（三）、膜的流动性受多种因素影响；细胞骨架不但影响膜蛋白的运动，也影响其周围的膜脂的流动。膜蛋白与膜脂分子的相互作用也是影响膜流动性的重要因素荧光抗体免疫标记实验（二）、膜脂与糖脂的不对称性�? 膜脂的不对称性：指同一种膜脂分子在膜的脂双层中呈不均匀分布；? 糖脂的不对称性：糖脂分子仅存在于质膜的ES面，是完成其生理功能的结构基础